史会娟，高 静，石冬璇，李 晶

    ·论著·

    ·中医·中西医结合研究·

    启膈散对食管癌细胞间同质黏附力的影响

    史会娟，高 静，石冬璇，李 晶

    背景食管癌的发病率有明显的地理特征，每年约有50%的新诊断病例发生在中国。目的研究启膈散对食管癌细胞间同质黏附力的影响，并探讨其作用机制。方法2015年3—6月，体外培养Eca109、TE13、TE1，采用机械法检测不同剂量启膈散(0、50、100 μg/ml)(分别为对照组、低剂量组、高剂量组)干预后Eca109、TE13、TE1同质黏附值，Western blotting法检测不同剂量启膈散(0、50、100 μg/ml)(分别为对照组、低剂量组、高剂量组)干预后Eca109、TE13、TE1中Cx32表达水平，免疫细胞化学法检测不同剂量启膈散(0 μg/ml和100 μg/ml)(分别为对照组、启膈散组)干预后Eca109、TE13、TE1中E-cadherin表达情况，划痕实验检测不同剂量启膈散(0、50、100 μg/ml)(分别为对照组、低剂量组、高剂量组)干预后Eca109、TE13、TE1迁移能力。结果低剂量组、高剂量组Eca109、TE13、TE1同质黏附值大于对照组(P1 材料与方法

    1.1实验材料人食管癌细胞株Eca109、TE13、TE1由河北省肿瘤研究所提供，购自中国科学院上海细胞生物学研究所；RPMI 1640培养基购自美国Corning公司；胎牛血清购自美国Biological公司；兔抗人E-cadherin、Cx32抗体购自美国Bioworld Technology,Inc.公司。

    1.2实验方法

    1.2.1细胞培养2015年3—6月，低分化人食管癌细胞株TE13及高分化人食管癌细胞株Eca109、TE1均用含10%胎牛血清的RPMI 1640培养基，在37 ℃、5% CO2的饱和湿度条件下培养。倒置显微镜下观察，待细胞贴壁生长至融合度达90%时，用0.25%胰蛋白酶消化并传代。

    1.2.2启膈散提取物制备将郁金75 g、沙参75 g、丹参50 g、浮小麦15 g、浙贝30 g、茯苓30 g、砂仁30 g、荷叶15 g采用水提法制备提取物，分装并储存于-80 ℃冰箱，用完全培养基配置1 mg/ml储存液，并用滤器过滤，保存于无菌离心管中，用封口膜封口，储存于4 ℃冰箱备用。

    1.2.3机械法检测细胞同质黏附值[5]采用机械法测定细胞同质黏附值，96孔板中分别加入Eca109、TE13、TE1(105个/ml) ......