朱秀丽，曲 凡，李美楠，郑 钰，陈 健，张文婷

    ·论著·

    儿童神经母细胞瘤Klf4表达及其影响因素研究

    朱秀丽，曲 凡，李美楠，郑 钰，陈 健，张文婷

    目的探讨儿童神经母细胞瘤(NB)Klf4表达情况及其影响因素。方法选取2007年1月—2013年3月于河北医科大学第四医院儿科治疗的NB患儿33例为病例组，另选取同期本院严重肾盂积水患儿10例为对照组。记录两组患儿临床资料，取病例组病理组织，对照组残余的正常肾上腺组织，采用免疫组化SP法检测Klf4表达情况，根据染色强度和Klf4阳性细胞所占百分比评价Klf4表达强度。结果病例组Klf4表达阳性10例(30.3%)，对照组Klf4表达阳性9例(9/10)，病例组Klf4表达阳性率低于对照组(χ2=8.801，P=0.003)。病例组不同性别、年龄、病理分期患儿Klf4表达阳性率比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。病例组节细胞-神经母细胞瘤患儿Klf4表达阳性率高于神经母细胞瘤患儿，术前化疗患儿Klf4表达阳性率高于术前未化疗患儿(P1 资料与方法

    1.1临床资料选取2007年1月—2013年3月于河北医科大学第四医院儿科治疗的NB患儿33例为病例组，其中男21例，女12例；年龄1～9岁，中位年龄5(3)岁。纳入标准：(1)根据组织学及免疫表型特点，经手术切除或活检病理检查证实为NB；(2)年龄

    1.2方法

    1.2.1资料收集记录两组患儿性别、年龄、疾病分型、病理分期及术前是否化疗。

    1.2.2Klf4表达检测Klf4兔抗人多克隆抗体购自Prosci Incorporated公司，按1∶100稀释；免疫组化染色试剂盒和DAB显色试剂盒均购自北京中杉金桥生物技术有限公司。取病例组病理组织标本，对照组残余的正常肾上腺组织标本。标本经10%甲醛溶液固定，石蜡包埋，切片厚度4 μm，依次经固定、脱水、热抗原修复、过氧化酶活性阻断、封闭抗原、一抗及二抗孵育、显色、复染、封固处理，以磷酸盐缓冲液(PBS)代替一抗作阴性对照，选择实验获得阳性标本作为阳性对照。Klf4染色阳性部位位于NB细胞质，根据染色强度分为:0分(无色)、1分(淡黄色)、2分(棕黄色)、3分(棕褐色)。根据Klf4阳性细胞所占百分比分为0分(阴性)、l分(阳性细胞所占百分比≤10%)、2分(阳性细胞所占百分比为11%～50%)、3分(阳性细胞所占百分比为51%～75%)、4分(阳性细胞所占百分比≥76%)。以两者评分乘积将Klf4表达强度分为4个等级：阴性(0～2分)、弱阳性(3～4分)、中度阳性(5～8分)、强阳性(9～12分)[1] ......