关 鹏，尹利军，许建文，韦家鼎，李智斐，邰志洪，桂裕昌，韦玉兰

    ·论著·

    腰椎间盘突出症活血化瘀治疗的目标蛋白筛选及鉴定

    关 鹏，尹利军，许建文，韦家鼎，李智斐，邰志洪，桂裕昌，韦玉兰

    背景 活血化瘀属于中医药特色疗法，也是临床上非手术治疗腰椎间盘突出症(LIDP)疗效优良的主要方法之一，既往有学者从病理、影像、免疫及基因等角度开展了大量研究，但有关活血化瘀治疗LIDP机制仍未明了。目的 通过同位素标记相对和绝对定量技术(iTRAQ)结合液相色谱与串联质谱(LC-MS/MS)筛选和鉴定LIDP活血化瘀治疗前后差异表达蛋白，筛选LIDP活血化瘀治疗的目标蛋白。方法 选取2013年7月—2014年12月于广西中医药大学第一附属医院治疗的血瘀证LIDP患者30例为研究对象，予活血化瘀治疗4周，观察患者临床疗效。分别于治疗前后提取患者外周血血清，通过去除高丰度蛋白、测定蛋白浓度、酶解蛋白、肽段iTRAQ标记、高效液相色谱分离、LC-MS/MS分析等程序和方法，筛选及鉴定治疗前后的差异表达蛋白。结合基因本体论注释及KEGG通路分析相关生物信息学，对差异蛋白的功能和代谢通路进行分析。结果 治疗后临床控制19例，显效8例，有效2例，无效1例，总有效率为96.7%(29/30)。iTRAQ联合LC-MS/MS鉴定到300个蛋白质组，其中209个蛋白各通道标记标签均有定量信息，筛选出20个差异表达蛋白，其中呈上调表达及下调表达的差异蛋白各10个。本研究对20个差异蛋白的KEGG富集结果显示，9个差异蛋白富集到27条信号通路。补体和凝血级联反应富集到3个差异蛋白，PPAR信号通路、百日咳、美洲锥虫病、金黄色葡萄球菌感染及系统性红斑狼疮富集到2个差异蛋白。百日咳、美洲锥虫病、金黄色葡萄球菌感染及系统性红斑狼疮等11条信号通路富集到补体C3，PI3K-Akt信号通路、黏着斑、肌动蛋白细胞骨架调节等9条信号通路富集到纤维连接蛋白1。结论 活血化瘀治疗血瘀证LIDP效果显著；载脂蛋白A1、载脂蛋白M、载脂蛋白C3、纤维连接蛋白1及补体C3很可能是血瘀证LIDP选用活血化瘀治疗的潜在血清靶蛋白 ......