王 杏，王 超，宋光耀，费雯婕，刘小娜，张 哲，马 欢

    ·论著·

    氧化苦参碱对高脂饮食诱导胰岛素抵抗载脂蛋白E基因敲除小鼠肝脏胆固醇代谢调控基因的影响

    王 杏，王 超，宋光耀，费雯婕，刘小娜，张 哲，马 欢

    目的 探讨氧化苦参碱对高脂饮食诱导载脂蛋白E(ApoE)基因敲除(ApoE-/-)小鼠模型肝脏胆固醇代谢调控基因的影响。方法 2014年4月—2015年1月，将17只SPF级C57BL/6J小鼠作为正常组(NC组)，给予基础饲料饲养；68只SPF级ApoE-/-小鼠给予高脂饲料饲养；均喂养16周后，再将高脂饲料喂养的ApoE-/-小鼠按照随机数字表法分为胰岛素抵抗模型组(IR组)、氧化苦参碱低剂量组(OXYL组)、氧化苦参碱中剂量组(OXYM组)、氧化苦参碱高剂量组(OXYH组)，每组17只，OXYL、OXYM、OXYH组分别给予氧化苦参碱25 mg·kg-1·d-1、50 mg·kg-1·d-1、100 mg·kg-1·d-1连续灌胃8周，各组实验过程中均给予等体积的纯水。分别检测各组小鼠葡萄糖输注率(GIR)，空腹血糖(FBG)水平，血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平，空腹胰岛素(FINS)水平，并计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)，并检测肝脏组织TC水平。采用RT-qPCR和Western blotting法检测肝脏组织固醇调节元件结合蛋白-2(SREBP-2)、固醇调节元件结合蛋白裂解激活蛋白(SCAP)、胰岛素诱导基因-2(INSIG2)、羟甲基戊二酸单酚辅酶A还原酶(HMGCR)、低密度脂蛋白受体(LDLr)mRNA及其蛋白水平。结果 IR组FBG水平，血清TC、TG、LDL-C、HDL-C水平均高于NC组(P1 材料与方法

    1.1 实验材料

    1.1.1 实验动物与饲料 雄性SPF级8周龄C57BL/6J小鼠17只、ApoE-/-小鼠68只，体质量18～20 g，购自北京大学医学部，动物合格证号SCXK(京)2011-0012。基础饲料热量：蛋白质24.2%，脂肪10.3%，碳水化合物65.5%；高脂饲料热量：蛋白质20.1%，脂肪59.8%，碳水化合物20.1%。

    1.1.2 实验药品与试剂 氧化苦参碱(苦参素胶囊)购于正大天晴药业股份有限公司；胰岛素放射免疫试剂盒购自上海研晶生物科技有限公司；SREBP-2、SCAP、INSIG2、HMGCR、LDLr抗体购于abcam公司；引物购自生工生物工程(上海)股份有限公司 ......