朱晋坤，毛 华，尹扬光，董 文，杜 峰，黎姗姗，邓梦扬

    ·论著·

    阿司匹林抑制血小板源性生长因子BB引起的主动脉血管平滑肌细胞增殖和迁移研究

    朱晋坤，毛 华，尹扬光，董 文，杜 峰，黎姗姗，邓梦扬

    目的 探讨阿司匹林对由血小板源性生长因子BB(PDGF-BB)引起的主动脉血管平滑肌细胞增殖和迁移的影响及其机制。方法 2014年8月—2015年9月，选取人主动脉血管平滑肌细胞株(T/G HA-VSMC)，分为对照组(不添加任何试剂)、PDGF-BB组(添加10 ng/ml PDGF-BB)、阿司匹林组(添加5 mmol/L阿司匹林)、PDGF-BB+阿司匹林组(添加10 ng/ml PDGF-BB和5 mmol/L阿司匹林)，采用CCK-8法检测4组不同培养时间(0、24、48、72 h)T/G HA-VSMC增殖吸光度(OD值)，Western blotting法检测p21waf1、p27kip1相对表达量，流式细胞仪检测细胞周期，细胞划痕实验检测细胞迁移率，Western blotting法检测基质金属蛋白酶1(MMP-1)相对表达量。结果 培养0 h时，4组T/G HA-VSMC增殖OD值比较，差异无统计学意义(P>0.05)。培养24、48、72 h时，PDGF-BB组T/G HA-VSMC增殖OD值较对照组升高，阿司匹林组T/G HA-VSMC增殖OD值较对照组降低(P1 材料与方法

    1.1 抗体与试剂 细胞周期蛋白抑制因子p21waf1(3733-1,1∶1 000)、p27kip1(1591-1,1∶1 000)抗体购自Epitomics 公司；基质金属蛋白酶1(matrix metalloproteinases，MMP-1)(BM 1270，1∶500)抗体购自武汉博士德生物工程有限公司；羊抗兔二抗-辣根过氧化物酶(HRP)由Epitomics公司赠送；八肽胆囊收缩素(CCK-8)购自日本株式会社同仁化学研究所；细胞周期检测试剂盒购自上海碧云天生物技术有限公司；人重组PDGF-BB(CYT-501)购自ProSpec公司；阿司匹林购自德国拜耳股份有限公司(药品批号BJ16177)。

    1.2 细胞培养 2014年8月—2015年9月，T/G HA-VSMC购自中国科学院典型培养物保藏委员会细胞库，由本院实验室冻存。将T/G HA-VSMC接种于50 ml细胞培养瓶中，置于含10%胎牛血清(life technology，美国)、100 U/ml青霉素和100 μg/ml链霉素(hyclone ......