龚建光，金 娟，赵 黎，林 波，梁世凯，何 强，李一文

    ·论著·

    自噬在尿毒症小鼠心肌细胞损伤中的作用研究

    龚建光，金 娟，赵 黎，林 波，梁世凯，何 强，李一文

    目的 探讨自噬与尿毒症小鼠心肌细胞损伤的关系及其发生的可能机制。方法 2015年8—12月选取SPF级C57BL/6-PAX6雄性小鼠50只，采用随机数字表法将小鼠分成对照组(6只)、假手术组(8只)、实验组〔5/6NC组(6只)、5/6NC+生理盐水组(10只)、5/6NC+渥曼青霉素组(10只)以及5/6NC+Beclin-1组(10只)〕。对照组研究过程中不做任何干预。假手术组仅与实验组同期进行两次手术，但不切除肾脏。实验组制备5/6肾切除尿毒症小鼠模型。造模6周时，5/6NC组不进行干预，5/6NC+生理盐水组、5/6NC+渥曼青霉素组、5/6NC+Beclin-1组分别给以0.9%氯化钠溶液1 ml 腹腔内注射，隔日1次；渥曼青霉素1 mg·kg-1·次-1，腹腔内注射，1次/d；腺病毒携带的Beclin-1 1×109pfu腿部肌肉注射，1次/只。造模12周时采用超声心动图检测各组小鼠心功能，ELISA法检测肌酐、尿素氮，采用免疫组化及Western blotting法检测处死后小鼠的心肌细胞自噬相关蛋白表达情况。结果 造模12周时，与对照组及假手术组比较，5/6NC组、5/6NC+生理盐水组左心室舒张末期内径(LVEDD)增厚、左心室短轴缩短率(LVFS)降低，肌酐及尿素氮上升(P1 材料与方法

    1.1 材料 2015年8—12月选择SPF级C57BL/6-PAX6雄性小鼠50只，周龄为8周，体质量19～21 g，购自中国科学院上海动物研究所；Atg5及Cathepsin D抗体购自DaKo公司；Rab7、LC3、Beclin-1抗体购自Santa Cruz公司，丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(AKT)抗体购自Cell Signal公司；α-Tubulin抗体、渥曼青霉素、肌酐和尿素ELISA检测试剂盒购自Sigma公司；腺病毒携带的Beclin-1由日本岐阜大学竹村教授友情赠送。

    1.2 实验分组 采用随机数字表法将实验小鼠分成对照组(6只)、假手术组(8只)、实验组〔5/6NC组(6只)、5/6NC+生理盐水组(10只)、5/6NC+渥曼青霉素组(10只)以及5/6NC+Beclin-1组(10只)〕。对照组研究过程中不做任何干预。假手术组仅与实验组同期进行两次手术，但不切除肾脏。实验组制备5/6肾切除尿毒症小鼠模型 ......