张爱梅，姜晓霞，陈 鑫，官晓筠，万慧娟，李 丽，马克涛，司军强

    ·论著·

    钙激活氯通道TMEM16A在大鼠心房和心室中的表达差异

    张爱梅，姜晓霞，陈 鑫，官晓筠，万慧娟，李 丽，马克涛，司军强

    目的 探究钙激活氯通道(CaCCs)TMEM16A在大鼠心房和心室组织中的表达情况，为临床治疗心肌缺血、心律失常以及心力衰竭等疾病提供新的治疗靶点。方法 2014年10月—2015年9月，将18只清洁级Sprague-Dawley大鼠适应性饲养1周，采用10%水合氯醛溶液腹腔注射麻醉后取心脏，分离心房和心室组织进行实验。采用Western blotting法和实时荧光定量反转录PCR(RT-qPCR)法分别检测大鼠心房和心室组织中TMEM16A及其mRNA水平。结果 大鼠心房和心室组织TMEM16A水平分别为(0.46±0.02)和(0.33±0.03)，心房和心室组织TMEM16A mRNA水平分别为(3.55±0.17)和(1.00±0.03)，大鼠心房组织中TMEM16A及其mRNA水平高于心室组织(P1 材料与方法

    1.1 实验动物 清洁级Sprague-Dawley大鼠18只，8～10周龄，雌雄不限，体质量200～250 g(新疆维吾尔自治区疾病控制中心动物饲养科提供)，许可证编号SCXK新2003-0001。

    1.2 主要试剂与仪器 Trizol(美国Life-invitrogen公司)，反转录试剂盒(美国Thermo Scientific Fermentas公司)，QuantiFastTMSYBR?Green PCR(德国Qiagen公司)，TMEM16A上下游引物〔生工生物工程(上海)股份有限公司〕，RIPA裂解液(北京索来宝科技有限公司)，兔多克隆TMEM16A抗体(美国Abcam公司)，辣根过氧化物酶偶联山羊抗兔二抗及β-actin一抗(北京中杉金桥生物技术有限公司)，实时荧光定量反转录PCR(RT-qPCR)和Western blotting操作中全套设备均来自Bio-Rad公司，BCA蛋白浓度测定试剂盒(上海碧云天生物技术有限公司)。

    1.3 实验方法

    1.3.1 心房和心室组织的取材与分离 2014年10月—2015年9月，将18只清洁级Sprague-Dawley大鼠适应性饲养1周后，采用10%水合氯醛溶液0.3 mg/kg腹腔注射麻醉，打开胸腔，暴露心脏，迅速取下完整心脏，置于PBS中反复冲洗，待将残留的血液清洗干净后，剪去与心房和心室相连的动静脉以及附着于其上的各种筋膜组织 ......