施华球，谢瑞莲

    ·论著·

    白介素1受体相关激酶1在乳腺癌紫杉醇耐受患者治疗中的作用机制研究

    施华球*，谢瑞莲

    目的 探讨白介素1受体相关激酶1(IRAK1)在乳腺癌紫杉醇耐受患者治疗中的作用机制。方法 选取2013年5月—2015年9月赣南医学院第一附属医院肿瘤科收集的乳腺组织(对照)及乳腺癌组织，其中对照女性16例，Basal-like型乳腺癌患者38例，Luminal-A型乳腺癌患者25例，Luminal-B型乳腺癌患者31例，HER2过表达型乳腺癌患者31例，三阴乳腺癌患者58例。取对照乳腺组织及乳腺癌组织，采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测IRAK1 mRNA的相对表达水平，采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测炎性因子白介素(IL)-6、IL-8和CXC趋化因子配体1(CXCL-1)表达水平。培养乳腺癌细胞株HMEC、MCF7、MB415、MB436、MB468、BT549、SUM159，采用体外低浓度梯度递增联合大剂量间断冲击方法诱导乳腺癌细胞株产生紫杉醇耐受性，检测未经处理的细胞株和紫杉醇耐受细胞株IRAK1 mRNA相对表达水平。经shRNA或空白序列NC-shRNA转染紫杉醇耐受乳腺癌细胞株，采用qPCR检测增殖相关基因细胞周期蛋白(Cyclin)D1、增殖细胞核抗原(PCNA)和Cyclin A相对表达水平，凋亡相关基因p53、c-myc、Bcl-2、c-erb-2相对表达水平，迁移相关基因Cullin 1、Bcl-6和KLF6相对表达水平，采用ALDEFLUOR实验检测醛脱氢酶(ALDH)活性。结果 各类型乳腺癌紫杉醇耐受患者IRAK1 mRNA相对表达水平均高于不耐受患者(P1 材料与方法

    1.1 材料与试剂 乳腺癌细胞株HMEC、MCF7、MB415、MB436、MB468、BT549、SUM159购于ATCC公司；小牛血清和DMEM培养基购于Invitrogen公司；IRAK1的NC-shRNA和shRNA由Dharmacon公司合成；转染试剂Lipofactamin 2000购于Bio-Rad公司；紫杉醇购于江苏恒瑞医药股份有限公司，用所随溶媒1 ml溶解成药物原液，再用DMEM培养基稀释成实验所需浓度；ALDEFLUOR试剂盒购于Stem Cell Technology公司；流式细胞仪购于BD公司。

    1.2 乳腺癌组织

    1.2.1 组织来源 选取2013年5月—2015年9月赣南医学院第一附属医院肿瘤科收集的女性乳腺活检组织(对照)及乳腺癌患者手术切除的癌组织 ......