汪 枫，喻小兰，夏纪毅，王晓燕，唐 利，曹 勇，唐小平，夏国栋

    ·论著·

    黄芩素和LY294002对人肝癌细胞系SMMC-7721细胞增殖和凋亡的影响研究

    汪 枫1，喻小兰2，夏纪毅3，5，王晓燕3，唐 利3，曹 勇3，唐小平3，夏国栋4*

    目的 探讨黄芩素和LY294002对人肝癌细胞系SMMC-7721细胞增殖和凋亡的影响。方法 2015年3月—2016年1月，取人肝癌细胞系SMMC-7721，制备细胞悬液。加入黄芩素(1、2、5、10、20、50、100、200、300 μmol/L，分别命名为A1、A2、A3、A4、A5、A6、A7、A8、A9组)或LY294002(1、2、5、10、20、30 μmol/L，分别命名为B1、B2、B3、B4、B5、B6组)，设定空白对照组和二甲基亚砜(DMSO)对照组，采用CCK8试剂盒检测各组细胞增殖水平；采用20 μmol/L黄芩素(C1组)单独处理，20 μmol/L黄芩素联合10 μmol/L LY294002(C2组)处理人肝癌细胞系SMMC-7721，设定空白对照组和DMSO组，采用流式细胞术检测各组细胞周期；采用2、5、10、20 μmol/L黄芩素(分别命名为D1、D2、D3、D4组)处理人肝癌细胞系SMMC-7721，设定空白对照组和DMSO组，采用显微摄影检测各组细胞数量；采用20 μmol/L黄芩素(E1组)单独处理，20 μmol/L黄芩素联合10 μmol/L LY294002(E2组)处理人肝癌细胞系SMMC-7721，设定空白对照组和DMSO组，采用流式细胞术检测各组早期凋亡和晚期凋亡情况；采用20 μmol/L黄芩素(F1组)、10 μmol/L LY294002(F2组)或20 μmol/L黄芩素联合10 μmol/L LY294002(F3组)处理人肝癌细胞系SMMC-7721，设定空白对照组和DMSO组，采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)法检测细胞外调节蛋白激酶(ERK)1/2、周期素D1(CyclinD1)、糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(AKT) mRNA表达水平；采用20 μmol/L黄芩素(G1组)、10 μmol/L LY294002(G2组)或20 μmol/L黄芩素联合10 μmol/L LY294002(G3组)处理人肝癌细胞系SMMC-7721，设定空白对照组和DMSO组，采用Western blotting法检测磷酸化ERK1/2(P-ERK1/2)、CyclinD1、磷酸化GSK-3β(P-GSK-3β)、磷酸化AKT(P-AKT)表达水平 ......