王青松，戴庆箐，王 浩，徐 竹，张艺凡，楚 兰*

    ·论著·

    视神经脊髓炎患者水通道蛋白4基因单核苷酸多态性位点的研究

    王青松1，戴庆箐2，王 浩2，徐 竹2，张艺凡2，楚 兰2*

    目的 从基因水平研究水通道蛋白4(AQP4)基因外显子区域单核苷酸多态性(SNP)位点以及其在视神经脊髓炎发病机制中的可能作用。方法 选取2010年3月—2012年6月湖北医药学院附属襄阳医院收治的视神经脊髓炎患者72例为视神经脊髓炎组，同时期本院收治的多发性硬化患者80例为多发性硬化组，取全血DNA进行AQP4基因的SNP位点分析，并通过特异性的定点诱变技术对携带AQP4基因表达序列的绿色荧光蛋白表达载体(pEGFP)重组质粒进行定点诱变，根据相应SNP位点突变生成相应突变质粒，脂质体转染法将相应质粒转染细胞建立抗AQP4抗体检测细胞株。分析视神经脊髓炎患者6种突变细胞株与原始细胞株血清抗AQP4抗体滴度水平及视神经脊髓炎组与多发性硬化组不同细胞株血清抗AQP4抗体滴度阳性率的差异。结果 视神经脊髓炎组共发现6个AQP4基因SNP位点，位于2号和5号外显子，分别为R108T、I110N、E280R、D281R、P295R、E317M。1、3、4号外显子区域未发现AQP4基因SNP位点，多发性硬化组未发现相应的AQP4基因SNP位点。构建R108T、I110N、R108T/I110N、E280R/D281R、P295R、E317M细胞株，R108T/I110N、E280R/D281R、E317M细胞株与原始细胞株血清抗AQP4抗体滴度水平比较，差异有统计学意义(P1 资料与方法

    1.1 临床资料 选取2010年3月—2012年6月湖北医药学院附属襄阳医院收治的视神经脊髓炎患者72例为视神经脊髓炎组，其中男14例，女58例；发病年龄12～60岁，平均发病年龄(40.6±13.0)岁；扩展残疾状况评分(EDSS)3.5～7.5分，平均EDSS(4.3±1.6)分；其中高危综合征16例。视神经脊髓炎及高危综合征患者入组标准参照2006年WINGERCHUK等[6]的诊断标准(除外抗AQP4抗体阳性)。选取同时期本院收治的多发性硬化患者80例为多发性硬化组，其中男36例，女44例；发病年龄18～66岁，平均发病年龄(37.7±11.8)岁；EDSS 2.5～6.0分，平均EDSS(3.6±2.1)分。多发性硬化患者入组标准参照国际通用2005年McDonald标准(除外脑脊液寡克隆区带阳性)[7]。手术切除的成年人脑膜瘤患者的瘤体组织(62岁男性患者)由湖北医药学院附属襄阳医院神经外科提 ......