张 莉，占 琼，赵 军，李建光，周 源，杨欢杰，王 宁

    ·论著·

    新疆维吾尔族人群SLC22A1基因多态性频率分布及糖尿病家族史对其突变的影响研究

    张 莉1，占 琼2，赵 军3，李建光4，周 源1，杨欢杰1，王 宁5*

    背景 转运蛋白(OCT)是近年来备受关注的药物转运体，由SLC22A1基因编码。SLC22A1基因具有显著的遗传多态性，已在多个种族中发现了多个基因突变，是引起2型糖尿病(T2DM)患者二甲双胍生物利用度差异的重要原因。目的 研究新疆维吾尔族青年男性SLC22A1基因rs34059508、rs4646277位点等位基因和基因型的频率分布，以及T2DM家族史对SLC22A1基因突变的影响，为T2DM患者基因导向性二甲双胍个体化治疗提供理论依据。方法 2014年9月—2015年9月，招募新疆维吾尔族男性健康志愿者276例为研究对象。采集受试者外周血5 ml，提取DNA，采用Snapshot技术平台分析受试者SLC22A1基因rs34059508、rs4646277位点等位基因、基因型频率和基因突变情况。结果 SLC22A1基因rs34059508、rs4646277位点基因频率分布符合Hardy-Weinberg遗传平衡，具有群体代表性(χ2=0.009，P=0.976；χ2=0.246，P=0.620)。亚洲人群、高加索人群、非裔美国人群、新疆维吾尔族人群SLC22A1基因rs34059508位点等位基因及基因型频率比较，差异有统计学意义(P1 对象与方法

    1.1 研究对象 2014年9月—2015年9月，招募新疆维吾尔族男性健康志愿者276例为研究对象，年龄18～25岁，平均年龄(20.9±1.2)岁。纳入标准：(1)年龄18～30岁；(2)志愿者彼此无血缘关系；(3)同意参与本研究。受试者均签署知情同意书，本研究获得新疆医科大学第一附属医院伦理委员会批准。

    1.2 方法 由护士采集受试者外周血5 ml，置于乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝管中，-80 ℃保存。加入细胞裂解液，10 000 r/min离心2 min(离心半径为8 cm)，向沉淀中加入200 μl缓冲液FG和2 μl蛋白酶K混合液，65 ℃水浴10 min，颠倒混匀。

    加入200 μl异丙醇，颠倒充分混匀后以12 000 r/min离心2 min(离心半径为8 cm)。加入500 μl无水乙醇，涡旋振荡5 s，12 000 r/min离心2 min(离心半径为8 cm)，重复上一步后将离心管倒置在干净的吸水纸上 ......