黄 芳，胡雅琳，姜程今，刘婧芳，何韶衡，李志刚

    ·论著·

    白介素18在颞下颌关节炎中的作用研究

    黄 芳1，胡雅琳1，姜程今1，刘婧芳1，何韶衡2*，李志刚3*

    目的 探究白介素(IL)-18在颞下颌关节炎中的作用。方法 2015年11月—2016年4月，30只SPF级雄性BALB/c小鼠适应性喂养1周后，采用随机数字表法分为A、B、C、D、E组，每组6只。B组～E组在第1、21天时分别注射Ⅱ型胶原酶；从第1天开始，A组仅注射0.9%氯化钠溶液，B组注射0.9%氯化钠溶液，C组注射IL-18，D组注射IL-18结合蛋白(IL-18BP)，E组注射IL-18、IL-18BP。第25天，采集各组小鼠外周血、组织灌洗液，采用流式细胞术检测外周血单核细胞/颞下颌关节组织灌洗液巨噬细胞中白介素18受体(IL-18R)阳性表达率，ELISA法检测外周血血浆/颞下颌关节组织灌洗液上清液中肿瘤坏死因子(TNF)-α、IL-1β水平。结果 B组、C组小鼠外周血单核细胞中IL-18R阳性表达率大于A组(P1 材料与方法

    1.1 实验动物 SPF级雄性BALB/c小鼠30只，8周龄，体质量18～22 g，购自北京维通利华实验动物技术有限公司，批号：11400700056942。

    1.2 实验药物 Ⅱ型胶原酶(北京索莱宝科技有限公司，批号：17101-015)；IL-18(R&D Systems，批号：B004-5)；IL-18BP(R&D Systems，批号：122-BP-100)。实验前称取Ⅱ型胶原酶1 g，完全溶于500 μl磷酸盐缓冲液(PBS)中，配制出浓度为2 g/ml的Ⅱ型胶原酶；称取IL-18、IL-18BP各1 μg，分别溶于1 ml PBS中，得到1 ml(1 μg/ml)原液，分别抽取1 μl原液加入99 μl PBS中，得到100 μl浓度为10 ng/ml的IL-18、IL-18BP，随用随配。

    1.3 实验试剂 BV421-CD11b、APC/Cy7-Ly-6c、PE-F4-80、APC/Cy7-CD11c表面抗体(BioLegend)，APC-IL-18R细胞内抗体(R&D Systems)，肿瘤坏死因子(TNF)-α、IL-1β ELISA试剂盒(北京达科为生物技术有限公司)，TNF-α抗体(Rockland公司)，IL-1β抗体(美国PeproTech公司)。

    1.4 实验仪器 酶标仪、普通台式离心机、全自动洗板机、-80 ℃冰箱(美国Thermo公司)，流式细胞仪(美国BD公司) ......