马雪丰，张景耀，毛 庆，陈 果，秦德萍，李 傲,3*

    ·论著·

    蛋白质精氨酸甲基转移酶1-非对称性二甲基精氨酸-二甲基精氨酸二甲胺水解酶1路径在肝纤维化、肾小管间质纤维化大鼠组织中的作用及意义

    马雪丰1，张景耀2，毛 庆1，陈 果1，秦德萍1，李 傲2,3*

    目的 观察蛋白质精氨酸甲基转移酶1(PRMT1)-非对称性二甲基精氨酸(ADMA)-二甲基精氨酸二甲胺水解酶1(DDAH1)代谢轴在肝纤维化、肾小管间质纤维化大鼠模型体内的变化情况，并探讨血清ADMA水平与肝纤维化、肾小管间质纤维化程度间的相关性。方法 2015年9—12月，从40只SPF级Sprague-Dawley雄性大鼠中随机抽取20只，将其平均分为溶剂对照组(A组)和肝纤维化模型组(B组)；再将剩余的20只Sprague-Dawley大鼠平均分为假手术组(C组)和模型组(D组)，各10只。采用四氯化碳(CCl4)慢性染毒和单侧输尿管结扎的方法分别建立大鼠肝纤维化模型(B组)和肾小管间质纤维化模型(D组)。采用皮下注射等量花生油和单侧输尿管只分离不结扎的方法分别建立溶剂对照模型(A组)和假手术模型(C组)。A、B组大鼠分别于干预8周后，C、D组大鼠分别于干预2周后，采用Masson三色染色后计算肝、肾胶原纤维面积百分比；采用化学比色法检测肝、肾组织羟脯氨酸(Hyp)水平；采用改良的高效液相色谱法检测血清ADMA水平；采用蛋白质免疫印迹法检测肝、肾组织PRMT1、DDAH1表达水平。结果 A组、B组、C组、D组大鼠血清ADMA水平分别为(0.43±0.07)、(1.10±0.21)、(0.45±0.03)、(1.26±0.21)μmol/L。B组大鼠血清ADMA水平高于A组(t=6.32，P1 材料与方法

    1.1 实验材料及时间

    1.1.1 实验动物 成年SPF级Sprague-Dawley大鼠40只，均为雄性，6～7周龄，体质量180～220 g，由中国人民解放军第三军医大学第三附属医院实验动物中心提供〔SCXK(渝)2012-0005〕。动物饲养及实验操作在第三军医大学实验动物中心进行〔SYXK(军)2007-0037〕，并按实验动物使用的3R原则给予Sprague-Dawley大鼠人道关怀。饲养条件：温度20～24 ℃，相对湿度55%，自由进食及饮水，12 h明/12 h暗交替，适应性饲养7 d 后开始实验。

    1.1.2 实验试剂 邻苯二甲醛、三巯基丙酸(美国Sigma公司)，ADMA标准品(美国Cayman公司),色谱级乙腈、甲醇(美国Fisher公司) ......