王景尚，孙明月，黄 烨，殷惠军

    ·论著·

    α-硫辛酸对血糖波动状态下2型糖尿病大鼠血管内皮细胞功能及PI3K/Akt/GSK-3β通路的影响

    王景尚1，孙明月2，黄 烨3*，殷惠军4

    目的 观察α-硫辛酸(α-LA)对血糖波动状态下2型糖尿病(T2DM)大鼠血管内皮细胞功能及磷脂酰肌醇3磷酸激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/糖原合酶激酶3β(GSK-3β)通路的影响，初步探讨其作用机制。方法 2013年7—12月，选取50只清洁级雄性Sprague Dawley(SD)大鼠，采用普通饲料适应性喂养2周后，采用随机数字表法抽取10只作为正常组(NOR组)，余下40只大鼠建造T2DM模型，给予高脂饲料6周后，一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ)35 mg/kg，然后给予普通饲料2周，并于第10周连续尾静脉采血检测空腹血糖(FBG)，计算空腹血糖变异系数(FBG-CV)，以FBG>16.7 mmol/L视为造模成功，共造模成功T2DM大鼠36只；NOR组始终给予普通饲料，并在相同时间点一次性腹腔注射等体积的柠檬酸-柠檬酸三钠缓冲液，且运用相同方法检测7次FBG，并计算FBG-CV。将造模成功的T2DM大鼠，以FBG-CV>2倍NOR组FBG-CV为波动高糖组(BHG组，24只，选取FBG-CV较大的20只进行实验)，以NOR组FBG-CV1 材料与方法

    1.1 药物与主要试剂 α-LA(批号：129K0218，用蒸馏水配制成所需浓度混悬液)、STZ(批号：040M1357)均购自美国Sigma-Aldrich公司；空腹血浆胰岛素(FINS)放射免疫试剂盒购自中国人民解放军总医院科技开发中心放免研究所；大鼠肝细胞生长因子(HGF)、糖基化终末产物(AGEs)定量ELISA试剂盒均为R&D公司进口分装产品；一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)试剂盒均购自南京建成生物工程研究所；一抗Akt(批号：4691S)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)(批号：9271S)、GSK-3β(批号：9315)、磷酸化糖原合酶激酶3β(p-GSK-3β)(批号：9336S)兔多克隆抗体均购自美国CST公司；辣根过氧化物酶标记的二抗(批号：ZB-2301)购自北京中杉金桥生物技术有限公司；动物饲料购自军事医学科学院实验动物中心，其中高脂饲料含10%脂肪、10%蔗糖、2.5%胆固醇、0.25%胆酸盐。

    1.2 动物分组及模型制备 2013年7—12月，选取50只清洁级雄性Sprague Dawley(SD)大鼠﹝购自北京维通利华实验动物技术有限公司 ......