亚砷酸钠中毒对大鼠海马组织神经元及肾功能的影响研究
染毒,肾脏,2结果,3讨论
秦文娟,管东方,邢国强,史红娟,吕海龙,姜玉峰*亚砷酸钠中毒对大鼠海马组织神经元及肾功能的影响研究
秦文娟1,管东方1,邢国强2,史红娟3,吕海龙2,姜玉峰1*
目的观察亚砷酸钠(NaAsO2)中毒对成年SD大鼠海马组织CA3区的神经元及肾脏形态学的影响。方法于2016年2—6月,48只12周龄雄性SPF级SD大鼠随机分为对照组及低、中、高染毒组,每组各12只。将NaAsO2用蒸馏水分别配制成5、10、20 mg/kg溶液分别供低、中、高染毒组大鼠自由饮用,对照组可自由饮用蒸馏水。建造染砷模型12周后,取4组大鼠脑组织海马部分和肾组织,HE染色光镜观察海马组织神经元与肾脏形态学改变;同时测定海马组织与肾组织中超氧化物歧化酶(SOD)活力、还原型谷胱甘肽(GSH)及丙二醛(MDA)含量。结果不同剂量染毒组海马组织神经元与对照组比较,神经元胞体形态欠规则,排列稀疏且数量减少,镜下可见大量脱落及坏死的神经元。不同剂量染毒组的肾组织较对照组出现病理性改变,例如变性、坏死、组织出现水肿及炎性细胞浸润等。4组大鼠海马组织及肾组织SOD活力、GSH和MDA含量比较,差异均有统计学意义(P1 材料与方法
1.1 实验动物及分组 于2016年2—6月,选用48只12周龄雄性SPF级SD大鼠(新疆医科大学第一附属医院动物实验中心提供),体质量为(200±20)g,随机分为对照组及低、中、高染毒组,每组各12只。将NaAsO2用蒸馏水分别配制成5、10、20 mg/kg溶液分别供低、中、高染毒组大鼠自由饮用,对照组可自由饮用蒸馏水。4组大鼠均自由进食普通饲料。饲养环境需模拟自然昼夜条件,温度控制在(21±2)℃,湿度要求40%~60%。持续染毒大鼠12周。
1.2 实验仪器 NaAsO2(Sigma公司),超低温4 ℃离心机(Thermo公司),倒置相差显微镜(Olympus),全自动Bio-rad酶标仪(Bio-rad公司),超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒、还原型谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)试剂盒(南京建成生物工程研究所)。
1.3 取材及标本制备 大鼠连续染毒期满12周后,每组大鼠中随机取6只,10%水合氯醛溶液腹腔注射麻醉后,用4%多聚甲醛溶液经心脏再灌注进行固定。开颅取脑,于冰上迅速分离海马组织和大脑皮质组织,并快速用预冷0.9%氯化钠溶液冲洗组织3次,在1.5 ml EP管中加入适量4%多聚甲醛溶液,进一步固定,取海马组织,经组织脱水、二甲苯透明、石蜡包埋后,切片机进行冠状位切片,厚度5 μm ......
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