刘珍财,赵海霞,陈 茜,刘光耀,袁 丁,张长城

    ·论著·

    ·中医·中西医结合研究·

    五子衍宗方对环磷酰胺致肝损伤的保护作用及其机制研究

    刘珍财,赵海霞,陈 茜,刘光耀,袁 丁,张长城*

    目的研究五子衍宗方(WP)对环磷酰胺(CTX)致肝损伤的保护作用及其机制，以期为临床治疗提供借鉴。方法2015年9月—2016年6月，将8周龄SPF级BALB/c雄性小鼠40只随机分为正常对照组、模型对照组、WP低剂量组、WP高剂量组，每组10只。应用WP提取黄酮类化合物并将其溶于1%羧甲基纤维素钠(CMC-Na)，WP低剂量组和WP高剂量组提前3 d分别给予黄酮类化合物140、280 mg/kg，灌胃给药30 d，1次/d；从第3天开始，除正常对照组腹腔注射等量0.9%氯化钠溶液外，其余各组均腹腔注射CTX 50 mg/kg造模，每隔2 d注射1次，共10次。模型对照组血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)水平与正常对照组比较有统计学差异提示造模成功。最后一次注射CTX 12 h后眼球取血、脱臼处死小鼠。检测血清ALT、AST水平；取肝脏，计算肝脏系数，HE染色法观察肝组织形态学表现，检测肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平。结果模型对照组小鼠血清ALT、 AST水平高于正常对照组(P1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 实验动物 2015年9月—2016年6月，选取8周龄SPF级Balb/C雄性小鼠40只，体质量22～25 g，由湖北省实验动物中心提供〔动物许可证号：SCXK(鄂)2008-0005〕,分笼饲养，环境温度(20±2)℃，相对湿度55%～65%，12 h光照，啮齿类动物饲料喂养，自由饮水，适应性饲养1个月。

    1.1.2 药品与试剂 枸杞子、五味子、菟丝子、覆盆子、车前子,均购自本草堂大药房；CTX，江苏恒瑞医药股份有限公司；丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)测定试剂盒购自南京建成生物工程研究所。

    1.2 方法

    1.2.1 黄酮类化合物的提取 称取4副药(1副药：枸杞子40 g，五味子5 g，菟丝子40 g，覆盆子20 g，车前子10 g)，总重460 g，加4 000 ml 75%乙醇浸泡过夜，第2天回流提取3次，第1次1.5 h,第2次1.5 h,第3次1.0 h；合并提取液，旋转蒸发仪(75 ℃)浓缩至1 000 ml；石油醚脱脂3次 ......