杨 眉，蒋春樊，哈春芳

    ·论著·

    白介素5/TNFRSF13B在深部浸润型子宫内膜异位症微环境中的表达及其意义研究

    杨 眉1,2，蒋春樊3，哈春芳4*

    目的探讨深部浸润型子宫内膜异位症(DIE)与正常子宫内膜组织中白介素5(IL-5)、TNFRSF13B表达的差异。方法选取2015年12月—2016年12月襄阳市中心医院妇科15例因DIE行手术治疗的患者为实验组，同期15例因输卵管再通行腹腔镜或开腹手术的患者作为对照组。选取基因芯片、实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)、酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫组织化学、Western blotting等方法检测IL-5及TNFRSF13B的表达。结果KEGG 信号通路分析结果显示涉及免疫应答的hsa04672(intestinal immune network for IgA production)通路在DIE中高表达，故对于主要涉及的IL-5、TNFRSF13B基因进行进一步分析。实时荧光定量PCR显示，实验组IL-5、TNFRSF13B mRNA相对表达水平高于对照组(P1 材料与方法

    1.1 标本来源 标本均取自2015年12月—2016年12月襄阳市中心医院妇产科，患者均知情同意，并签署知情同意书。本研究经襄阳市中心医院伦理委员会批准。选取15例因DIE行手术治疗患者的子宫内膜组织为实验组，年龄23～48岁，平均年龄(38.5±7.8)岁；均为Ⅳ期(根据美国1985年修订的子宫内膜异位症分期标准[6])，且切除标本经病理科证实诊断为DIE患者。同时，选取同期15例因输卵管再通行腹腔镜或开腹手术患者的子宫内膜组织为对照组，年龄29～45岁，平均年龄(35.4±5.2)岁，患者均有规律的月经周期，基础体温均为双相型，近3个月均未接受过激素类药物治疗，无重大内科及外科合并症。两组年龄比较，差异无统计学意义(t=1.281,P=0.211)实验组及对照组患者均在术前1 d行诊刮术取子宫内膜组织活检，在术中抽取腹腔液2～5 ml，并采集实验组深部结节病灶，以上标本均在严格无菌条件下进行保存。

    1.2 基因芯片筛选DIE差异表达基因 采用上海康成生物工程有限公司提供的Roche NimbleGen 12×135K人类基因表达谱芯片。用Trizol总RNA抽提试剂盒(Invitrogen)对子宫内膜组织进行裂解,并进行RNA纯化。用紫外分光光度计分别测定其在260 nm和280 nm处的吸光度值，对RNA的纯度和浓度进行定量计算。琼脂糖凝胶电泳检测RNA完整性 ......