马俊骥，郭 平，郭 昱，吴江华

    ·论著·

    血浆miR-92a-3p和miR-204-5p及miR-186-5p诊断胆管癌的价值研究

    马俊骥*，郭 平，郭 昱，吴江华

    背景胆管癌(CCA)起源于胆管上皮细胞，起病隐匿，恶性度极高。循环血中微小RNA(miRNA)在CCA诊断中的价值尚待研究。目的探讨血浆miR-92a-3p、miR-204-5p、miR-186-5p诊断CCA的价值，以期提高CCA的诊断水平。方法选取2015年5月—2016年1月河北医科大学第二医院符合纳入标准的CCA患者16例为病例组。同期选取本院无肝胆疾病患者15例为对照组。制备两组患者血浆标本，采用RT-qPCR法检测血浆miR-92a-3p、miR-204-5p、miR-186-5p表达水平。采用二元Logistic回归分析计算miR-92a-3p、miR-204-5p、miR-186-5p联合的Logistic回归方程；绘制miR-92a-3p、miR-204-5p、miR-186-5p及其联合诊断CCA的受试者工作特征曲线(ROC曲线)，计算ROC曲线下面积(AUC)、灵敏度、特异度、约登指数。结果病例组miR-92a-3p表达水平高于对照组，miR-204-5p、miR-186-5p表达水平低于对照组(P1 对象与方法

    1.1 研究对象 选取2015年5月—2016年1月河北医科大学第二医院符合纳入标准的CCA患者16例为病例组。纳入标准：(1)年龄18～90岁；(2)根据临床症状及影像学检查结果等初步诊断为CCA，术后病理由资深病理科专家确诊为CCA；(3)尚未行手术、放疗、化疗。排除标准：合并其他部位的原发性恶性肿瘤。同期选取本院符合纳入标准的无肝胆疾病患者15例为对照组。纳入标准：腹部CT未发现急性化脓性胆管炎、胆总管结石、胆总管囊肿等肝胆系统病变。排除标准：合并其他部位的原发性恶性肿瘤、急性感染性疾病、自身免疫性疾病、药物性肝炎和酒精肝所致的血清胆红素升高。本研究已获河北医科大学第二医院伦理委员会批准(编号2013028)，研究对象均签署知情同意书。

    1.2 研究方法

    1.2.1 收集一般资料 收集两组患者性别、年龄。

    1.2.2 制备血浆标本 采集患者静脉血2 ml置于经乙二胺四乙酸二钾(EDTA-2K)处理的抗凝管中，抗凝处理后分装到2 ml无酶离心管中，4 ℃条件下1 600×g离心10 min，将上清液转移到另一个新的2 ml无酶离心管中，4 ℃条件下16 000×g再次离心10 min ......