李进领，李 智，李 琳，张 静，贾延劼，安 颖

    1.450007河南省郑州市，郑州大学附属郑州中心医院神经内科 2.119991俄罗斯莫斯科，莫斯科国立谢东诺夫第一医科大学 3.450052河南省郑州市，郑州大学第一附属医院神经内科

    ·论著·

    *通信作者：张静，主治医师；E-mail：yzkl0112@163.com

    Let-7b对骨髓基质干细胞诱导分化为神经元的作用研究

    李进领1，李 智2，李 琳1，张 静3*，贾延劼3，安 颖1

    1.450007河南省郑州市，郑州大学附属郑州中心医院神经内科 2.119991俄罗斯莫斯科，莫斯科国立谢东诺夫第一医科大学 3.450052河南省郑州市，郑州大学第一附属医院神经内科

    目的探讨Let-7b在大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)分化为神经元过程中的作用。方法2013年1—12月将80只SPF级SD大鼠随机分为空白对照组、阴性对照组、Let-7b-up慢病毒载体(LV-rno-Let-7b-up)组、Let-7b-inhibition慢病毒载体(LV-rno-Let-7b-inhibition)组，每组20只。将阴性对照组、LV-rno-Let-7b-up组、LV-rno-Let-7b-inhibition组大鼠分别感染EGFP空病毒，采用颈椎脱臼法处死4组大鼠，并获取MSCs，传代培养4代后备用。取传代培养的MSCs感染慢病毒，具体为：空白对照组、阴性对照组不进行感染，LV-rno-Let-7b-up组、LV-rno-Let-7b-inhibition组分别感染LV-rno-Let-7b-up、Let-7b-inhibition，采用MTT法检测感染前、感染后24 h、感染后5 d MSCs存活率。采用法舒地尔对4组进行诱导实验，观察MSCs分化为神经元的分化效率。采用免疫组化法检测4组神经元烯醇化酶(NSE)、神经微管结合蛋白(MAP-2)、微管相关蛋白(Tau)水平，RT-PCR法检测4组NSE、MAP-2、Tau mRNA水平。结果LV-rno-Let-7b-up组MSCs于LV-rno-Let-7b-up感染后第3天荧光表达最强，LV-rno-Let-7b-inhibition组MSCs于LV-rno-Let-7b-inhibition感染后第5天荧光表达最强。感染第5天时，阴性对照组、LV-rno-Let-7b-up组、LV-rno-Let-7b-inhibition组MSCs感染率分别为87.46%、86.81%、87.12%。感染后24 h、5 d阴性对照组、LV-rno-Let-7b-up组、LV-rno-Let-7b-inhibition组MSCs存活率低于空白对照组(P1 材料与方法 ......