李 辰,黎 莹,李 丽,杨成芳,钟毓娟,吴 丹,石 琳,陈 莉,李勇文

    ·论著·

    蝉翼藤单体提取化合物对乙醇诱导小鼠肝脏氧化损伤保护作用研究

    李 辰,黎 莹,李 丽,杨成芳,钟毓娟,吴 丹,石 琳,陈 莉,李勇文*

    目的探讨蝉翼藤单体提取化合物——甲基阿魏酸对乙醇诱导小鼠肝脏氧化损伤及B淋巴细胞瘤2相关X蛋白(Bax)、B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)表达的影响,研究甲基阿魏酸的保护作用。方法2017年3—6月，选取SPF级雄性成年C57BL/6小鼠60只,采用随机数字表法分为正常组、模型组和甲基阿魏酸低剂量组(5 mg/kg)、甲基阿魏酸中剂量组(10 mg/kg)、甲基阿魏酸高剂量组(20 mg/kg)，每组12只。除正常组以外,其余各组每天早上50%乙醇溶液按照0.1 ml/10 g体质量灌胃。每天下午,甲基阿魏酸给药组分别给予相应剂量的甲基阿魏酸灌胃,连续4周。取肝组织苏木素-伊红(HE)染色,观察其病理改变。计算肝脏指数、脾脏指数，生化分析法测定血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)及肝组织过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平，反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和Western blotting法分别检测肝组织中Bax、Bcl-2 mRNA及蛋白的表达。结果与正常组比较,模型组、甲基阿魏酸低、中、高剂量组小鼠肝脏指数、脾脏指数增加，血清ALT、AST、TC、TG水平升高，肝组织CAT、GSH-Px、SOD水平降低，MDA水平升高，肝组织Bax mRNA/Bcl-2 mRNA、Bax/Bcl-2升高(P1 材料与方法

    1.1 药品和试剂 甲基阿魏酸(美国Sigma公司)，无水乙醇(AR级,汕头市西陇化工有限公司)，丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)试剂盒(南京建成生物工程研究所)，总RNA提取试剂盒、cDNA第一链合成试剂盒〔天根生化科技(北京)有限公司〕，兔抗B淋巴细胞瘤2相关X蛋白(Bax)、B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)、β-actin抗体、山羊抗兔二抗〔生工生物工程(上海)股份有限公司〕，DYY-6C型双稳定时电泳仪(北京六一生物科技有限公司)，Model 680型酶标仪(美国Bio-Rad公司)，Chemi Doc型凝胶成像系统(美国Bio-Rad公司) ......