吴佳航，张弛，董思佳，尹浩

    膝关节骨性关节炎(KOA)是临床常见的骨性关节炎，是以关节软骨退化及骨质增生为主要变化的慢性退行性疾病，主要症状为关节压痛、疼痛、肿胀、僵硬、活动受限以及关节畸形等。该病多发于老年人，且其发病年龄愈趋年轻化。KOA的发病机制尚不完全清楚，本研究旨在通过建立兔KOA模型探索“舒筋”手法对KOA家兔关节液白介素1β(IL-1β)、5-羟色胺(5-HT)的影响。

    1 材料与方法

    1.1 实验家兔 2015年8—12月选取健康成年家兔50只，体质量2.0～2.5 kg，雌雄各半，采取单兔单笼，全程饲料喂养(成都中医药大学实验家兔中心提供)，自由饮水，自然日光照射，室温15～25 ℃，湿度45%～55%。实验通过医学实验家兔伦理和福利委员会批准。

    1.2 主要试剂及仪器设备 木瓜蛋白酶(美国Sigma公司，型号P3250)；玻璃酸钠注射液(山东博士伦福瑞达制药有限公司，规格2 ml∶20 mg)；家兔IL-1β ELISA试剂盒(Elabscience公司，AK0015OCT29007)、家兔5-HT ELISA试剂盒(Elabscience公司，AK0016MAR17009)；苏木素-伊红染液(武汉谷歌生物科技有限公司，G1005)；包埋机(武汉俊杰电子有限公司，JB-P5)；病理切片机(上海徕卡仪器有限公司，RM2016)；正置光学显微镜(日本尼康公司，NIKON ECLIPSE CI)等。

    1.3 研究设计

    1.3.1 造模 50只家兔按随机数字表法分为空白组12只和造模组38只，采用木瓜蛋白酶注射法于实验第1、4、7天于造模组家兔右膝关节腔注射4%木瓜蛋白酶溶液制备家兔KOA模型。造模结束1周后，随机抽取2只造模组家兔，检验造模成功与否，造模成功标准：家兔膝关节红肿，跛行，膝关节冲洗液微黄稍混；处死家兔打开其膝关节腔，可见关节软骨光滑度、色泽有明显改变，软骨表面出现糜烂或溃疡，有纤维性增生及边缘有骨赘形成等。

    1.3.2 干预方法 将造模组剩余36只家兔按随机数字表法分为模型组、玻璃酸钠组和手法组，每组12只。空白组和模型组均常规饲养，未行治疗；玻璃酸钠组右膝关节腔注射玻璃酸钠注射液0.2 ml，1次/周，共注射5次。手法组对家兔右膝关节行“舒筋”手法治疗，12 min/次，隔日1次。“舒筋”手法参照《实验针灸学》[1]《中国兽医针灸学》[2]《兔针灸穴位的研究》[3]中家兔骨度分寸法取穴操作(见表1)。

    1.3.3 标本采集与预处理 关节液采集 ......