董小林，战丽萍，邬刚，李青芸，魏欢，李建辉，李妍平

    本研究背景和创新点：

    帕金森病是一种常见的神经退行性疾病，病因是中脑黑质多巴胺能神经元凋亡缺失，多巴胺合成减少是导致其震颤和运动障碍的主要原因，酪氨酸羟化酶(TH)是多巴胺能神经元的主要分子标记和功能分子。机体利用左旋酪氨酸(L-tyrosine)，在TH的催化下生成左旋多巴，左旋多巴在芳香族脱羧酶的催化下脱去羧基最后生成左旋多巴胺。本研究分离、培养胎鼠原代神经元，采过反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)从多巴胺能神经元中克隆大鼠TH(rTH) cDNA，将该片段包装到重组慢病毒中。将Lv-rTH重组慢病毒感染大鼠成纤维细胞REF，体外检测表明Lv-rTH重组慢病毒能在体外成功和高效地表达rTH。通过脑内立体定位注射6羟多巴胺(6-OHDA)的方法建立了大鼠帕金森病模型，建模后进行基因治疗，给予Lv-rTH重组慢病毒脑内注射，通过阿扑吗啡诱发旋转实验进行行为学评分，免疫组化进行神经元恢复评分，结果发现：Lv-rTH重组慢病毒能显著减少由阿扑吗啡诱导的自体旋转且能上调大鼠帕金森病模型TH表达阳性细胞所占比例。

    帕金森病(Parkinson's disease，PD)是一种常见的神经系统变性病，患者的主要临床表现为：运动迟缓、肌强直、静止性震颤、姿势步态异常等[1-2]。已有研究发现遗传因素和多种杀虫剂是PD的重要危险因素[3]。PD的病理特征主要是中脑黑质多巴胺能神经元减少和坏死。多巴胺能神经元主要是一类能产生多巴胺的神经元，能将神经冲动信号传递至纹状体，而纹状体主要控制骨骼肌的运动，因此多巴胺合成的减少导致了机体的运动障碍。基于该病理基础，PD患者的治疗主要通过维持纹状体内多巴胺和乙酰胆碱两种递质的平衡，使临床症状得以改善。左旋多巴最早用于治疗PD，该药物在治疗早期病情缓解效果较好，但是随着治疗“蜜月期”的结束，左旋多巴会导致多种运动并发症[4]。而多巴胺激动剂类药物虽能一定程度缓解症状，但长期使用会导致消化道反应和精神症状等不良反应[5]。手术治疗虽能改善症状，但不能根治疾病，术后仍需应用药物治疗，也可能带来相关并发症，如舌头和手的麻痹、辨距不清和意识不清等症状[6]，也存在一定局限性。

    基因治疗主要是将相关基因通过载体导入病灶部位，对靶点区域的细胞进行修复、补偿和校正，以恢复相关区域正常生理功能，基因治疗主要适用于病灶区域单一和明确的疾病。国外有研究报道利用神经营养因子对PD进行基因治疗，主要是通过导入神经营养因子〔包括胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)、Neurturin和脑源性神经营养因子(BDNF)〕促进和保护相关神经元的存活[7] ......