豆姗姗，艾阳，陆思静

    既往20年内，鲍曼不动杆菌(AB)已逐渐成为一种主要的，且具有高致病率和高病死率的院内致病菌[1]。菌株耐药性迅速形成与播散，使多重耐药(MDR)甚至泛耐药(XDR)AB的临床检出率均明显上升，成为全球医疗安全的威胁。有报道显示，临床分离的AB对碳青霉烯类抗生素的耐药率高达80%，对头孢哌酮/舒巴坦(CFS)、左氧氟沙星(LVX)、米诺环素的耐药率约为40%[2-3]。MDR-AB对最后一线治疗药物替加环素(TIG)和多粘菌素逐渐表现出耐药，但很少有新的抗生素问世，因此，迫切需要选择有效的治疗方案来控制MDR-AB的感染率和耐药率。目前以TIG、β-内酰胺酶抑制剂和多粘菌素为基础的药物联合治疗MDRAB感染的研究已取得了一些成绩[4]，而具体治疗方案及用药剂量尚未确定，仍需进一步探究。本实验目的在于评价舒巴坦(SUL)、CFS、TIG分别结合多粘菌素B(PMB)、美罗培南(MER)、比阿培南(BPM)、亚胺培南(IPM)和LVX对临床分离MDR-AB的体外抗菌活性，并探讨药物联合对MDR-AB效应，为临床选择及应用抗菌素提供实验依据。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 菌株来源 选取2016年7月—2017年3月在锦州医科大学附属第一医院ICU、烧伤科、呼吸内科、神经内科、血液科收集的70株非重复MDR-AB菌株，质控菌株为大肠埃希菌ATCC25922和铜绿假单胞菌ATCC27853(由广州市南方医院临床微生物室提供)。

    1.1.2 药品与试剂 SUL、CFS、MER、BPM、IPM、TIG、PMB和LVX(均购自中国药品生物制品监督管理所)。MH肉汤(上海万疆生物技术有限公司)；血平板(广东环凯生物科技有限公司)。

    1.1.3 仪器 BD-100全自动微生物分析仪；DHP恒温培养箱(上海实验仪器厂)；比浊仪(法国梅里埃公司)；微量加样器；96孔板(美国康宁公司)。

    1.2 方法

    1.2.1 抗菌药物溶液与菌悬液的配制 抗菌药物溶液参照CLSI2012版[5]配制，其中LVX用前现配。在已分纯并过夜新鲜培养的细菌平板上挑取4～5个形态相同的菌落接种于MH肉汤中增菌6 h，然后于3 ml无菌0.9%氯化钠溶液中用比浊仪调整浓度至0.5麦氏单位，再用MH肉汤按1∶1 000稀释，即为接种菌悬液。

    1.2.2 微量肉汤稀释法与棋盘法 SUL、CFS、MER、BPM、IPM、TIG、PMB贮备液和LVX以灭菌的MH肉汤倍比稀释成1 024、512、256、128、64、32、16、8、4、2、1、0.5、0.25 μg/ml等系列浓度 ......