杨天睿，苗云波，张彤，段靳岚，朱滢，穆宁晖，余锦雯

    缺血性心脏病严重威胁人类健康，且发病年龄呈现日益年轻化的趋势。心肌缺血重新恢复血流供应后，反而会造成心肌超微结构、功能、代谢及电生理方面的进一步损害，甚至是不可逆损伤，继而出现严重的心律失常和心功能不全，严重者可导致死亡，即出现心肌缺血再灌注损伤[1]。缺血与再灌注时间是再灌注损伤的重要影响因素，了解其对缺血再灌注损伤的影响程度有着重要意义。本研究运用Langendorff离体心脏灌注系统建立实验树鼩心肌缺血再灌注模型，分别采用不同的停灌和再灌注时间进行干预，通过寻找组间心肌酶学及切片梗死面积的差异来源，分析缺血、再灌注时间及其交互作用对再灌注损伤的影响程度。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物 2015年9月—2017年5月，选取健康成年雄性滇西亚种实验树鼩60只，4～6个月龄，体质量120～150 g。实验动物由中国医学科学院医学生物学研究所树鼩种质资源中心提供，动物许可证：滇发驯繁(92-29)号，合格证：SCXK(滇)K2015-0002。术前禁食过夜，自由饮水。本研究经云南省第一人民医院伦理委员会批准。

    1.2 设备与器材 Langendorff离体心脏灌注系统(型号：PowerLab，生产商：ADInstruments)是研究小鼠、大鼠、豚鼠、树鼩等动物心脏的理想工具，该系统具有恒定流量或恒定压力两种模式，实现冠状动脉流量监控，同时温控控制精确恒定，可记录和分析各种心血管参数。

    1.3 造模方法 实验树鼩水合氯醛(1 ml/只)腹腔麻醉，经腹腔肝素化(普通肝素1 000 U/只)抗凝。迅速开胸分离心脏，在主动脉根部快速将主动脉与其他血管一并剪断后取出心脏，立即放人0～4 ℃的K-H液中，排出残留血液，尽快将心脏移至Langendorff离体灌注系统装置上。主动脉逆行插管，同时放置球囊进入左心室后，用K-H液(pH为7.35～7.45)灌注，恒温(37 ℃)恒压(60 mm Hg，1 mm Hg=0.133 kPa)，冠状动脉流量为6～12 ml/min，将肺动脉根部剪开以保证冠状动脉回流通畅，灌注液用量筒计时收集，以代表冠状动脉流量。

    K-H液成分为NaCl 6.92 g/L、KCl 0.35 g/L、KH2PO41.2 ml/L、NaHCO32.1 g/L、MgSO40.296 g/L、 葡 萄 糖2 g/L、CaCl20.28 g/L、乙二胺四乙酸(EDTA) 0.187g/L。盐酸调节溶液酸碱度。灌注全程K-H液用95% O2和5% CO2混合气平衡 ......