李树坡，李鹏，余捍东，赵晶

    肺癌是居于我国城镇居民发病率第一位的恶性肿瘤，其发病率和病死率一直呈上升的趋势，其中非小细胞肺癌(NSCLC)约占85%[1]。研究报道，NSCLC患者血清雌激素水平高于其他类型肺癌和正常人群[2]，经抗雌激素治疗可显著提高患者的生存率，提示血清雌激素水平在NSCLC的发生发展中可能发挥重要作用[3]。研究表明，微小RNA(miRNA)与肿瘤的发生发展、侵袭转移等密切相关，其表达水平在肿瘤中表现为上调或者下调，同时伴随相关功能的改变，提示miRNA在肿瘤的诊断和治疗中具有较大的应用前景[4]。在与血清雌激素水平相关的肿瘤(乳腺癌)中，miR-365表达水平发生变化，并且与血清雌激素水平存在关联[5]。与血清雌激素水平关系密切的NSCLC、miR-365表达水平如何，是否存在与乳腺癌类似的变化尚未见相关报道。本研究通过分析NSCLC患者血清雌激素水平与miR-365表达水平的变化及其相关性，以期为NSCLC的早期诊断和治疗提供新的思路。

    1 对象与方法

    1.1 研究对象 选取2015年3月—2016年4月在三峡大学附属仁和医院接受原发性NSCLC手术切除的57例患者作为NSCLC组，其中男35例，女22例；年龄47～73岁，平均年龄(59.5±5.8)岁；病理类型：腺癌31例，鳞状细胞癌22例，腺鳞癌4例；TNM分期按照国际肺癌研究会(IASLC)公布的标准[6]，其中Ⅰ～Ⅱ期33例，Ⅲ～Ⅳ期24例。纳入标准：为初次发现并在本院接受治疗。排除标准：既往有内分泌、女性生殖系统疾病和其他系统肿瘤。选取同期本院体检中心体检健康者50例作为对照组，其中男38例，女12例；年龄46～70岁，平均年龄(57.7±6.4)岁。对照组经检查均无肝、肺、肾、脑等疾病，无消化道和血液系统疾病史。本研究经三峡大学附属仁和医院医学伦理委员会批准，患者均签署知情同意书。

    1.2 试剂与仪器 雌二醇ELISA检测试剂盒(美国Linco Research公司)；miScript反转录试剂盒与miScript SYBR Green PCR试剂盒(QIAGEN公司)；Trizol-LS(美国Invitrogen公司)；Smart Spec plus核酸蛋白检测仪(美国 Bio-Rad公司)；Light Cycler 480Ⅱ基因扩增检测仪(德国Roche公司)；引物由上海生工生物技术服务有限公司合成并修饰。

    1.3 研究方法

    1.3.1 一般资料收集 收集对照组性别、年龄，收集NSCLC组性别、年龄、吸烟(吸烟定义为20支/d ......