贺继刚，李贝贝，韩金秀，李洪荣，撒亚莲，严丹，杨晓华*

    冠心病引起的心肌梗死(即心肌损伤)已成为目前世界范围内的头号“杀手”。据世界卫生组织(WHO)统计：2000—2012年冠心病位居世界人口死亡原因首位[1-2]。目前冠心病的治疗主要包括外科治疗、内科治疗及细胞治疗。细胞治疗中应用最为成熟的是骨髓间充质干细胞(BMSCs)，虽然已有大量文献证实BMSCs可以改善心肌梗死患者心功能[3]。但亦有学者提出，BMSCs临床应用尚不成熟，主要表现为：(1)BMSCs安全性仍不确切；(2)目前为止国际、国内尚无文献报道BMSCs能够有效分化成为心肌细胞；(3)异体BMSCs治疗心肌梗死依然遥远。前期研究证实过表达GATA-4 BMSCs可以更为有效地增强BMSCs的抗凋亡能力从而修复受损心肌[4]。在前期研究基础上[4]，本研究进一步聚焦于细胞分泌外泌体(Exosome)，其具有多种生物学功能，可以使细胞在不需要直接接触下完成细胞间生物信号转导。

    本研究提取慢病毒携带GATA-4转染小鼠BMSCs分泌的Exosome，通过采用体外流式细胞术、Western blotting法检测Exosome对心肌细胞的保护作用；给予心肌梗死模型小鼠干预措施后提高其心功能并行心肌梗死局部脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(Tunnel)检验，表明过表达GATA-4 BMSCs分泌的Exosome可以通过增强BMSCs抗凋亡能力，有效改善心肌梗死后小鼠的心功能，现报道如下。

    本研究创新点：

    (1)本课题根据国内外关于GATA-4、外泌体(Exosome)及骨髓间充质干细胞(BMSCs)修复心肌梗死后损伤心肌结果的提示，结合本课题组的前期研究结果提出科学问题及假说。(2)近几年国内外学者的研究侧重点为BMSCs修复心肌梗死后损伤心肌的作用及细胞中的GATA-4独立发生的作用，而关于BMSCs、GATA-4及Exosome与心肌损伤修复的研究鲜有报道。本研究首次明确过表达GATA-4 BMSCs分泌的Exosome在改善心功能中起重要作用。(3)本研究从细胞系、原代细胞、组织和动物整体水平等多方面进行实验设计，挖掘Exosome、GATA-4及BMSCs三者间的关系，探索Exosome修复心肌损伤可能的机制。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物 2017年1—12月选取健康4周龄SPF级C57BL/6小鼠45只，均为雄性，由成都达硕实验动物中心提供，动物许可证号为SCXK(川)2015—030。小鼠的喂养、观察均按照非临床研究管理规范(GLP)规定执行[4] ......