余杨，付艳丽，孙翔

    高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)持续性感染是导致宫颈上皮内瘤变(CIN)及宫颈癌的主要病因[1-4]。发达国家建立的完善筛查体系，使宫颈癌的发病率和病死率显著下降，新发病例居于全身恶性肿瘤的第10位，而在发展中国家，新发病例位于第2位[5]。由此可见，基于HR-HPV建立可进一步分选出高级别CIN和宫颈癌高危人群的合理筛查体系很重要和迫切。肿瘤是多种因素共同作用的结果，HR-HPV持续性感染是宫颈癌发生的必要条件，却非唯一致病条件，HR-HPV感染后诱发的宫颈病变转归与机体免疫功能，尤其是宫颈局部微环境免疫功能密切相关[6]。机体免疫调控复杂多样，免疫细胞之间，外来抗原HR-HPV和免疫细胞之间，HR-HPV、免疫细胞与局部微环境之间均存在相互制约、相互调节的交互作用和交联影响。免疫抑制细胞构筑的免疫抑制微环境通过免疫耐受、免疫逃逸等机制促进宫颈病变的进展[7]，调节性T淋巴细胞(Treg)是一群发挥免疫抑制功能的独特辅助性T淋巴细胞亚群，叉头翼状螺旋转录因子3(Foxp3)是Treg的特征性分子标志，可对肿瘤免疫应答从启动到效应的整个阶段全程调控。本研究同步监测宫颈局部微环境HR-HPV载量和Treg变化，探讨其与宫颈病变进程的联系和发展趋势，为HR-HPV持续性感染者更深入地分流诊治提供临床依据。

    本研究背景：

    宫颈癌的发生、发展是多种因素参与调控的复杂过程，仅高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)诱导细胞内DNA突变是不够的，还需在慢性炎症的持续刺激下不断累积变异，再加上微环境改变肿瘤细胞的生物学特性，发生恶性特征转化的强大激活信号，基因组、微环境、炎症和免疫体系发生改变的综合结果导致了癌变的风险，因此，HR-HPV持续性感染是宫颈癌发生的必要条件而非充分条件，基于HR-HPV感染并能方便、无创、准确量化地反映宫颈癌生物学行为变化的标志物是临床重点。目前宫颈局部微环境中HR-HPV载量对调节性T淋巴细胞(Treg)表达的影响及其两者同时在HR-HPV免疫逃逸和宫颈病变进程中相互作用的报道较少。本研究围绕HR-HPV抗原既可激发免疫反应又可负向抑制免疫反应的特点，探讨不同微环境诱导的Treg表达差异对宫颈病变进程或促进或抑制的双向影响，为宫颈癌前病变以及宫颈癌个性化诊疗方案提供实验指导和临床思路。

    1 资料与方法

    1.1 临床资料 选取2012年1月—2015年7月河南理工大学第一附属医院经液基薄层细胞检测技术(TCT)筛查、HR-HPV基因分型检测〔聚合酶链式反应(PCR)-反向点杂交法〕 ......