马嘉艺，郭砚，冶娟，马文宇

    随着医学的发展，人类的平均寿命不断增长，皮肤衰老问题得到人们越来越多的关注。皮肤衰老是一种不可避免的生理变化过程，随着年龄增长，皮肤角质形成细胞、成纤维细胞数量减少及功能下降，弹性蛋白和胶原蛋白合成减少及萎缩，皮肤变得缺乏弹性、松弛、粗糙，并伴有不规则色素沉着、皱纹等[1]。与此同时，人们对自然来源的抗氧化剂的需求也越来越多。黑果枸杞为茄科枸杞属多年生灌木，是一种独特的药食两用植物，在藏药中称为“旁玛”[2]。研究证实，黑果枸杞果实中含有大量花色苷、原花青素、多糖、黄酮等生理活性成分，具有抗氧化、抗疲劳、延缓衰老、降血糖、降血脂、预防动脉粥样硬化、增强免疫功能等作用[3]。分光光度法测得黑果枸杞的原花青素含量为16 μg/g，是蓝莓的18倍[4]。目前国内外对黑果枸杞的研究多集中于其常见生理活性成分的提取、纯化、结构分析及含量测定，尚未见对青海黑果枸杞原花青素抗衰老作用的研究。本文旨在从小鼠背部皮肤模型真皮层厚度、胶原纤维、弹力纤维及基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9方面研究黑果枸杞原花青素对小鼠皮肤衰老模型的保护作用。

    1 材料与方法

    1.1 主要材料和仪器 青海黑果枸杞原花青素粉末购自西安万方生物科技有限公司；维生素E滴剂及D-半乳糖粉末购自北京索莱宝科技有限公司；长波黑斑效应紫外线(UVA)+中波红斑效应紫外线(UVB)紫外线光疗仪购自南京卡知电子科技有限公司；UVB和UVA型UV辐照度监视器购自台湾路昌电子企业公司；HE染色试剂盒购自武汉博士德生物工程有限公司；Weigert弹力纤维染色试剂盒购自北京索莱宝科技有限公司；IX71型Olympus倒置显微镜购自Olympus公司；Trizol RNA提取液购自ambion公司；小鼠MMP-2、MMP-9、内参β-actin的PCR引物购自华大基因公司；RT-PCR试剂盒及SYBR Green I嵌合荧光定量PCR 扩增试剂盒购自TaKaRa公司。

    1.2 动物分组 2016年10月—2017年12月，选取45日龄SPF级昆明种雌性小鼠50只 ......