胡洁，旷昕，张倩璐，李欢颜，阳巧云，彭良玉

    本研究创新点：

    成年大鼠脊髓背角中络丝蛋白持续表达的作用至今仍不清楚。本研究采用鞘内注射络丝蛋白shRNA慢病毒载体的方法抑制健康成年大鼠及神经性疼痛大鼠脊髓背角络丝蛋白表达的方法，首次发现神经性疼痛大鼠同侧脊髓背角中络丝蛋白的表达明显减少，进一步抑制其表达水平则明显加重神经性疼痛。而对于健康成年大鼠及神经性疼痛大鼠非损伤侧，络丝蛋白表达减少对疼痛行为则无明显影响。提示，脊髓背角络丝蛋白表达减少是神经性疼痛的重要分子机制，将为临床上治疗神经性疼痛提供新的分子靶点。

    络丝蛋白(Reelin)是一种细胞外基质糖蛋白，在胚胎时期主要参与神经元的正常迁移和定位过程。出生后，络丝蛋白主要参与突触功能的调节过程。络丝蛋白分泌减少或缺失可导致神经元的连接和突触的重塑发生异常，导致认知功能障碍而参与多种精神疾病的发生和发展过程，例如自闭症、精神分裂症、双向情感障碍、阿尔茨海默病[1]。

    络丝蛋白在成年大鼠的脊髓中也有表达，尤其在脊髓背角浅层有较高的表达，其具体病理生理作用仍不清楚[2]。前期研究发现，络丝蛋白表达缺失的Reeler小鼠可导致机械缩足阈值(paw withdrawal mechanical threshold，PWMT)增加而热辐射刺激潜伏期(paw withdrawal thermal latency，PWTL)缩短[3]。但由于络丝蛋白参与胚胎时期脊髓背角神经元的发育和迁移定位过程，Reeler小鼠脊髓背角的神经元定位和板层结构发生明显紊乱。脊髓背角结构正常的成年大鼠，其脊髓背角中络丝蛋白的作用仍不清楚。本课题组的前期研究发现，神经性疼痛大鼠脊髓背角中络丝蛋白的表达明显减少[4]。本实验通过鞘内注射络丝蛋白shRNA慢病毒载体，抑制大鼠脊髓背角中络丝蛋白的表达，观察其对正常大鼠和坐骨神经结扎诱发神经性疼痛大鼠疼痛行为的影响，为临床治疗神经性疼痛提供新的分子靶点。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物 2015年，选取SPF级雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠，8～10周龄，体质量280～320 g，购自南华大学动物部。室温24～25 ℃，光照时间为8：00～20：00，分笼饲养3 d。本研究经南华大学附属第一医院伦理委员会批准，严格遵守南华大学附属第一医院动物保护和使用规定。

    1.2 方法

    1.2.1 鞘内置管、给药和分组 购入后饲养1周左右，体质量达标的119只大鼠腹腔注射戊巴比妥钠50 mg/kg麻醉，采用YAKSH等[5]的研究方法自枕骨大孔处行蛛网膜下腔置管 ......