孙蓓，张丽，刘晓东，佟仲生

    人表皮生长因子受体-2(HER2)阳性表达的乳腺癌患者常治疗失败率及复发率高，预后较差。拉帕替尼(LAP)属于一类常见的表皮生长因子酪氨酸激酶抑制剂，其目前在抗肿瘤领域应用广泛，且在实际应用中表现出显著的抗肿瘤活性作用[1-3]。光动力疗法(PDT)对增生性疾病有很好的治疗效果，其在抗肿瘤治疗中表现出高效、毒副作用小等优点，其与化疗、靶向治疗等联合进行抗肿瘤治疗已经成为研究的热点，但是大部分研究主要集中在胸腹腔肿瘤，而其在乳腺癌中的研究报道较少，并且其抗肿瘤的机制尚不清楚[4-6]。5-氨基乙酰丙酸(5-ALA)是血红素合成过程中粪卟啉Ⅲ原卟啉IX(PpIX)的前体。氨基乙酰丙酸(ALA)-PDT实现了由外源光敏剂的直接输入到ALA在组织内内源性生成原卟啉光敏剂经光照射启动PDT的突破。本研究探讨新型光敏剂5-ALA用于PDT对HER2阳性乳腺癌细胞系SKBR3的抑制情况，并分析其具体机制，同时讨论PDT联合LAP对HER2阳性乳腺癌的治疗效果，以期为HER2阳性乳腺癌的治疗提供实验依据，为相关研究提供参考。

    1 材料与方法

    1.1 研究时间 本研究时间为2016年5月—2017年12月。

    1.2 主要仪器及试剂 半导体激光光动力治疗仪(天津市雷意激光技术有限公司)，5-ALA、MTT、Rhodamine 123(美国Sigma公司)，LAP(英国葛兰素史克公司，批号：H201006493)，胎牛血清、胰蛋白酶、细胞培养基(美国Gibco公司)，流式细胞术检测试剂盒及抗体(美国BD公司)。

    1.3 MTT法检测细胞生长抑制率 将对数生长期的HER2阳性乳腺癌细胞系SKBR3随机分为空白对照组、LAP组、PDT组、LAP+PDT组。每组设3个复孔。空白对照组：不做干预。LAP组：分别加入不同浓度梯度(0.50、1.00、2.00、5.00、10.00 μmol/L)的 LAP，孵育24 h；PDT组：分别加入不同浓度梯度(0.25、0.50、1.00、2.00、4.00 mmol/L)的5-ALA，孵育3 h给予激光照射；LAP+PDT组：分别加入不同浓度梯度(0.50、1.00、2.00、5.00、10.00 μmol/L)的LAP，孵育21 h，再加入不同浓度梯度(0.25、0.50、1.00、2.00、4.00 mmol/L)的5-ALA，孵育3 h给予激光照射。PDT组及LAP+PDT组光照能量密度为2.5 J/cm2，PDT治疗完毕后更换完全培养基，其他条件不变情况下继续培养16 h ......