王青，刘莹，袁林，孟庆红，姚开虎

    百日咳是由百日咳鲍特菌(bordetella pertussis，BP)引起的急性呼吸道感染性疾病，该病具有较强的传染性。尽管有疫苗接种预防措施，百日咳依然在全世界范围内流行[1]。近年来，多个疫苗接种率较高的国家，包括美国、英国和澳大利亚，相继报道百日咳发病率在保持多年低水平后再次升高[2-3]，引发学者关注。同样，我国也存在百日咳反弹迹象。近期局部地区的血清学调查结果提示国内百日咳并不少见[4-5]，但监测数据却显示在百日咳发病率下降或上升阶段，没有百日咳流行的周期性波动，提示百日咳上报数据可能未能反映其真实发生状况，可能是因为百日咳实验室检测方法不普及。百日咳实验室检测主要包括细菌培养、分子生物学检测细菌核酸、血清学检测抗体水平等，其中百日咳细菌培养耗时较长，距离契合临床需求具有一定的距离，而血清学要在病程后期才具有明确的诊断意义[6-7]。通过实时荧光定量聚合酶链式反应(Q-PCR)试剂盒进行快速的百日咳检测，不仅能迅速掌握疫情，也为尽早开展临床治疗提供病原学依据，且国内已有商品化的百日咳Q-PCR试剂盒。为了更客观地评价Q-PCR试剂盒在百日咳检测中的应用价值，开展了本次调查研究。

    1 对象与方法

    1.1 研究对象 2016年11月—2017年4月在首都医科大学附属北京儿童医院采集无热咳嗽患儿〔无热咳嗽为病程中有咳嗽，伴一过性低热(<24 h)或无热〕鼻咽拭子302例，以及临床诊断为百日咳患儿鼻咽拭子50例。纳入标准：无热咳嗽且年龄<1岁者；排除标准：严重呼吸道感染及先天性气道发育异常或畸形引发的咳嗽者，支气管哮喘、支气管异物、肺不张及胸腔积液等其他原因引起的咳嗽者。百日咳临床诊断标准：咳嗽持续时间≥2周且伴有下列至少1个症状：痉挛性咳嗽；鸡鸣样回声；无其他明显原因的咳嗽后呕吐[7]。本研究获得本院伦理委员会审批，患儿家属均知情同意。

    1.2 主要试剂 碳琼脂选择培养基(CM0119 CHARCOAL AGAR)及选择性培养基添加物—头孢拉定购自OXOID；脱纤维羊血购自北京兰博利德商贸有限公司；采样用鼻咽拭子为藻酸钙拭子 ......