常全，张娜娜，马冬

    腹主动脉瘤(AAA)是一种老年常见高死亡率的心血管系统疾病，目前临床上仍无有效治疗药物，发病机制仍不明确[1]。本课题组前期研究发现，KLF5基因在人和小鼠AAA组织中表达升高，并且小鼠髓系特异性敲除KLF5基因能够下调Myo9b表达，减少巨噬细胞的浸润并抑制小鼠AAA的形成，但是对于详细的KLF5基因调控炎症相关基因表达的网络分析仍需探讨[2]。因此，为了进一步验证髓系KLF5基因表达在炎症和AAA形成过程中的促炎作用，本实验系统分析了CaPO4诱导髓系KLF5基因表达缺失(LyKLF5-/-)小鼠和野生型(WT)小鼠AAA组织的mRNA表达谱，利用在线生物信息学网站对血管炎症及AAA形成相关的基因进行功能和网络分析，为寻找有效药物治疗AAA疾病提供新的分子靶点和实验依据。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物 健康雄性的C57BL/6小鼠，SPF级，由河北医科大学实验动物中心提供。将其中KLF5-flox小鼠和LysM-cre小鼠杂交培育雄性髓系遗传性LyKLF5-/-小鼠3只，并与同笼WT C57BL/6小鼠3只，AAA模型构建后共同培养14 d。LyKLF5-/-小鼠和WT 6～8周龄雄性小鼠(Jackson Laboratory，Bar Harbor，ME)均由本实验室繁殖提供。

    1.2 研究时间 2015年1月—2016年1月进行小鼠培养及mRNA芯片筛查。2019年2—4月对差异基因进行生物信息学分析。

    1.3 CaPO4诱导小鼠AAA模型[3]将LyKLF5-/-小鼠和WT小鼠进行持续麻醉，无菌条件下进行腹部手术，暴露腹主动脉血管，分离肾动脉分支至髂总动脉血管，先包裹浸有CaCl2的无纺布条，后换为浸有磷酸缓冲盐溶液(PBS)的无纺布条。取出棉条后用0.9%氯化钠溶液冲洗，缝合内膜，撒上青霉素粉末，再缝合腹部外膜。

    造模成功标准：造模后腹主动脉最大直径(d2)/瘤旁血管直径(d1)≥2。所有小鼠造模成功，实验过程没有死亡。

    本研究创新点：

    (1)应用生物信息学发现髓系KLF5基因表达缺失小鼠抑制腹主动脉瘤(AAA)形成的炎症网络调控机制。(2)发现主要基因Bcas3、Hck表达上调和Retnla、Olig1、Tnfrsf11a表达下调参与炎症调控，为靶向治疗AAA提供新的分子靶点。

    本研究不足：

    本研究未进行临床研究，可能存在基因表达之间的相互影响，导致研究结果并不准确。

    1.4 腹主动脉组织总RNA的提取及mRNA表达谱的检测 分离小鼠损伤腹主动脉 ......