张燕，范晓翔，章美武，庄鲁辉，毛达峰

    肝纤维化是由不同病因引起的持续性慢性肝损伤的常见结果，在损伤因子的作用下，病情呈动态进展，可逐渐形成肝硬化进而引起一系列严重并发症，包括门脉高压、肝衰竭和肝细胞癌等，并增加患者死亡率[1-2]。目前，早期肝纤维化的治疗已成为世界性的重大难题。即使在高效抗病毒治疗的时代，大多数慢性肝病患者也无法获得根本性治疗，肝移植仍然是治疗失代偿性肝硬化或肝癌的唯一有效方法[3]。因此，开发有效的抗纤维化药物来阻止肝硬化进展，甚至逆转晚期肝纤维化极为迫切。长期以来，肝纤维化被认为是一个不可逆的过程。然而近期研究提示，肝纤维化是可逆的，且其与肝细胞失活紧密相关，即通过细胞衰老、凋亡或激活回到更为静止的表型[4]。核苷酸结合寡聚化结构域NOD样受体(NLRs)、Toll样受体(TLRs)能诱导炎性细胞死亡，参与调节先天免疫和适应性免疫，在肝细胞失活过程中扮演着重要角色[5]。NLRC5是NLRs家族最主要的成员，在免疫组织或器官如脾脏、肺、胸腺和肝脏中有较强表达，可介导炎症抑制及抗病毒反应。最近研究表明，NLRC5通过抑制κB抑制蛋白激酶α抗体(IKKα)和κB抑制蛋白激酶β抗体(IKKβ)的磷酸化，负性调节核因子(NF)-κB信号通路，在肝脏中高度表达[6]。LI等[7]研究显示，降低RAW264.7小鼠巨噬细胞中NLRC5的表达可有效上调脂多糖促炎反应，包括促进白介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子(TNF)的分泌。以上研究提示NLRC5是一种重要的负性炎症途径调节因子[8]。然而，关于NLRC5在肝纤维化中的作用还没有进一步的研究报道。本研究旨在探讨NLRC5在转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的肝星状细胞(HSC)活化中的作用，并探讨其与肝纤维化的关系，以评估其临床应用价值。

    1 材料与方法

    1.1 体内实验

    1.1.1 体内实验建模 2018年3—7月选取24只8周龄雄性C57BL/6小鼠(体质量15～20 g)，由宁波市第二医院实验动物中心提供。于24 ℃下适应性喂养1周，12 h昼夜交替，自由饮水及进食。根据随机数字表法分为实验组、正常对照组和逆转组，每组8只。取20 ml CCl4(上海展云化工有限公司)与30 ml橄榄油(山东浩中化工科技有限公司)制成40%的CCl4橄榄油注射液。实验组：实验开始时，皮下注射40%的CCl4橄榄油注射液0.02 ml/g，每周2次，持续4周，于第4周最后1次注射后24 h将小鼠处死，取其肝组织。逆转组：实验开始时，皮下注射40%的CCl4橄榄油注射液0.02 ml/g ......