曾蕾，杨凯旋

    肿瘤细胞由原发灶或转移灶脱落进入外周血液成为循环肿瘤细胞(circulating tumor cells，CTCs)，这一概念由澳大利亚医生ASHWORTH[1]在1869年首次提出。CTCs存在于血液循环系统中，可通过血液进行微转移，是具有高活力、高转移潜能的肿瘤细胞，与肿瘤的复发、转移密切相关。近年来，CTCs作为新型生物标志物已成为各类肿瘤研究的热点，在乳腺癌[2]、肺癌[3]、前列腺癌[4]、结直肠癌[5]等肿瘤诊断中得到了较为广泛的应用。目前CTCs在肿瘤的早期诊断、实时个体化用药指导，监测肿瘤复发、阐明肿瘤耐药机制以及改善临床医生对疾病进展和转移的认识方面起着重要作用[6-8]，近年来，许多学者对CTCs在鼻咽癌的诊断与治疗中的作用开展了大量研究。本文针对CTCs的特性、检测方法、鉴定方法以及其在鼻咽癌中的研究进展做一综述，以提高临床医生对CTCs的认识。

    1 CTCs的特性

    有研究发现，肿瘤的转移扩散在早期发病时可能就已经出现，而不是之前认为的是肿瘤后期的结果[9]，CTCs可在早期随着血液循环到达并重新定殖于原发病灶或远端器官，保持休眠状态，在特定的条件刺激下释放进入外周血液循环，最终发展成一个明显的复发或转移性病灶[10]。由于肿瘤细胞的异常增殖和代谢，其基因表达与修饰、蛋白合成与修饰以及某些极性颗粒物质积聚发生异常，导致肿瘤细胞的大小、形态、介电属性和细胞表面的标志蛋白均与正常细胞不同，是分离肿瘤细胞的理论基础[11]。通常，CTCs与正常外周血细胞比较，具有核质比大、体积大(白细胞直径为8～10 μm，红细胞为 8 μm，CTCs为 12～25 μm)、质量重、密度高等特点。CTCs的细胞表面具有某些特异性的蛋白标志物，是与其他血细胞的区别。上皮细胞黏附分子(epithelial cell adhesion molecule，EpCAM)是肿瘤细胞特有的标志蛋白，在CTCs中特异性高表达，而在血细胞中不表达。此外，部分细胞角蛋白(cytokeratins，CKs)，例如：CK6、CK18、CK19，也是其特异性标志物，但是CTCs不表达白细胞的表面标志蛋白CD45。因此，根据以上研究结果将CTCs的免疫组织学概念定义为细胞表面EpCAM(+)/CK(+)/CD45(-)的有核细胞。有研究在健康人体的血液中进行验证，没有发现具有相同免疫组织学特征的非恶性上皮细胞[12]，但在某些良性疾病患者血液中却发现了具有相同免疫特性的细胞，如良性结肠病变[13]、胰腺病变[14]、良性乳腺疾病[15-16]等 ......