饶紫琦，刘菁，陈炳林，邓永然，刘文其

    肺癌的发病率、病死率均居全球恶性肿瘤的首位，目前主要是以手术、放疗、化疗以及靶向治疗为主的综合治疗，但总体生存率仍然较低。肿瘤微环境(tumor microenvironment，TME)一直以来被认为是癌症的主要标志，在肿瘤的发生、发展及预后中均起着重要的作用，而巨噬细胞是TME系统中最重要的免疫炎性细胞群之一[1]。巨噬细胞由单核细胞分化而来，不同于其他免疫细胞，其最大特征是具有极强的功能异质性和可塑性，并能够根据机体内复杂微环境中的信号被分化为不同功能的细胞亚群，即经典活化的M1型巨噬细胞与替代活化的M2型巨噬细胞[2]。M1型巨噬细胞通过分泌多种促炎性因子、趋化因子等参与炎症和宿主免疫反应，而M2型巨噬细胞则分泌抑制性细胞因子，下调免疫应答，促进肿瘤进展[3]。然而，巨噬细胞在维持表型平衡的过程中受多种因素及机制的影响。

    热疗是继传统治疗方式后的一种新兴、无创、绿色的癌症治疗方式，目前已被广泛运用于各种肿瘤的辅助治疗中，得到了许多临床医生及科研学者的广泛关注[4]。热疗过去被认为可以对肿瘤细胞进行直接杀伤，通过抑制肿瘤细胞的增殖生长，促进凋亡，改善TME中的低pH值、乏氧状态，增加肿瘤的血流灌注和氧合[5]。最近的研究发现，热疗还可以有效刺激机体产生抗肿瘤的免疫反应[6]。有研究表明，热疗不仅能直接作用于肿瘤细胞进行杀伤，还能调节机体微环境中各种免疫细胞的活性，包括T淋巴细胞、自然杀伤细胞(natural killer cell，NK)和抗原提呈细胞(antigen-presenting cells，APC)等[7]。因此，推测热疗带来的热效应能作用于TME，调控巨噬细胞的表型及对肿瘤细胞的恶性生物学行为产生抑制作用。目前，TME以及免疫治疗对于以往直接靶向治疗肿瘤细胞是一种新的思路，热疗是如何改善TME、提高机体免疫反应的相关机制仍然需要通过大量的研究来探索。本研究从分子和细胞的角度初步探讨热疗对M2型肿瘤相关巨噬细胞的调控作用，分析热疗抗肿瘤的免疫机制，探索热疗在治疗肿瘤方面的价值。

    1 材料与方法

    1.1 研究时间 2019年6—12月。

    1.2 材料 RAW264.7细胞(M0型巨噬细胞)购自中国科学院，由广西医科大学基础实验室保存，小鼠肺癌细胞(LLC)购自ATCC，DMEM培养液和胎牛血清购自Gibco公司，聚合酶链反应(PCR)引物由上海生物工程有限公司设计并合成，小鼠干扰素γ(IFN-γ)、小鼠白介素(IL)-4购自Peprotech公司 ......