于妍，王春爱，秦晓宇，李玉兰，梁曦，温晓辉，刘敏

    穴位注射是在传统针灸基础上发展起来的一种疗效显著的中西医结合疗法，其以经络学说为指导，将腧穴、经络、药效有机结合，兼具针刺和药物的治疗作用，具有用药剂量小、不良反应少的特点，还能大幅度提升临床疗效。近年来穴位注射方法在辅助麻醉及心律失常治疗领域上广泛应用[1-2]。

    布比卡因是一种长效的酰胺类局麻药，因其常规剂量下使用相对安全，且起效快速，常被用于各类手术[3]。然而，过量使用或误入静脉仍会导致心律失常、心肌收缩力降低以及循环衰竭从而引发心脏骤停[4]。临床常用针刺辅助麻醉以减少布比卡因所需剂量，从而避免其不良反应[5]。内关穴是治疗心血管疾病的常用穴位之一，刺激内关穴具有抗心律失常、减轻心肌损伤的作用[6]。大量研究表明葛根素具有明显的心脏保护作用[7]。本研究旨在探讨穴位注射葛根素对布比卡因诱导的心肌线粒体结构和功能损伤的影响及其可能的机制。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物及时间 6月龄SPF级Wistar雄性大鼠40只，体质量(280±20)g，由兰州兽医研究所实验动物中心提供(SCXK[甘]2019-0002)。本实验遵循美国国家卫生研究院《实验动物使用指南》，并经甘肃省中医院伦理委员会批准(批件号2019-005)。实验时间为2019年1—12月。

    1.2 药品与试剂 盐酸布比卡因注射液购自上海朝辉药业有限责任公司(批号：1404113)，葛根素注射液购自成都天台山制药有限公司(批号：180201)，JC-1试剂盒购自Beyotime公司，大鼠三磷酸腺苷合成酶(ATPase)酶联免疫吸附实验(ELISA)试剂盒购自Elab Science公司，三磷酸腺苷(ATP)ELISA试剂盒、Anti-过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1α(PGC-1α)购自Abcam公司，Anti-核呼吸因子(NRF1)、Anti-线粒体转录因子A(mtTFA)购自GeneTex公司。

    1.3 实验仪器 鼠控温解剖台(众实迪创科技发展有限公司)，微量注射泵(圣诺医疗设备有限责任公司，SN-50F6)，多道电生理记录仪(AD instruments，DBS-170)，Power Lab数据采集及分析系统(埃德仪器国际贸易公司)，精密电子天平(Sartorius公司)，高速冷冻离心机(Sigma 公司)，-80 ℃超低温冰箱(Form scientific 公司)，酶联免疫检测仪(Thermo 公司) ......