王玉洁 ，王健 ，周静威

    糖尿病肾病(diabetic kidney disease，DKD)是糖尿病常见的微血管并发症，也是导致慢性肾病及终末期肾脏病(end stage renal disease，ESRD)的主要病因，30%～40%的糖尿病患者会发展为DKD[1-2]。研究表明，细胞衰老和凋亡是DKD发病和进展的重要机制[3-4]。研究发现DKD患者肾小管上皮细胞衰老相关蛋白p16的表达变化与其肾组织损伤程度及肾功能均存在显著关系[5]。动物实验发现，DKD大鼠肾组织中凋亡相关蛋白Caspase-3 mRNA水平显著增加[6]。多项研究证实，中医药可以通过抑制肾脏细胞衰老和凋亡，改善DKD肾损伤[7-13]。因此，运用中医药抑制肾脏细胞衰老和凋亡，可能成为延缓DKD进展的新策略。

    清热消癥方是北京中医药大学东直门医院肾病专家王耀献教授多年来治疗DKD的经验方，他认为“热邪”是DKD发病的主要病因，“伏热致癥”是DKD的核心病机，尤其在DKD中期，热伏肾络，结为癥瘕，故立清热消癥法[14]，以清解内积热邪，消散肾络癥瘕。前期临床研究发现清热消癥法在降低DKD中期患者的中医证候评分和尿蛋白排泄量方面具有较好的临床效果[15]。课题组体内实验表明清热消癥方可以调控肠源性脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)介导的下游炎症通路，降低炎性因子toll样受体4(toll-like receptor 4，TLR4)和核因子κB(nuclear factor kappa-B，NF-κB)的表达以及肠源性LPS水平，调节DKD小鼠的肠道菌群，降低DKD小鼠蛋白尿，抑制DKD肾损伤，发挥肾保护作用[16]。中药的化学成分多样，靶点繁多，因此本研究旨在通过动物体内实验进一步明确清热消癥法是否可以通过抑制肾脏细胞衰老和凋亡，改善DKD肾损伤，延缓DKD进展。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物 2019年7—11月选用SPF级健康雄性SD大鼠30只，8周龄，体质量(180±20)g，购自维通利华(北京)实验动物技术有限公司〔SCXK(京)2012-0001〕。将大鼠饲养于北京中医药大学东直门医院屏障环境动物实验室〔SCXK(京)2015-0001〕，室温22～25 ℃，湿度45%～60%，光照条件为明/暗交替循环12 h，大鼠自由饮水和饮食，适应性喂养3 d。本实验由北京中医药大学东直门医院动物实验伦理委员会批准(编号：19-41)。

    1.2 实验试剂与仪器 链脲佐菌素(streptozotocin ......