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编号:121715
电针对缺血再灌注后学习记忆障碍大鼠BDNF/TrkB/PI3K/Akt 通路的影响及对海马神经元保护作用研究
http://www.100md.com 2023年8月8日 中国全科医学 2023年第33期
货号,1材料与方法,2结果,3讨论
     苏凯奇,吕转,吴明莉,罗萌,高静,聂晨晨,刘昊,冯晓东,*

    脑卒中是我国人口寿命年减少的首要病因,缺血性脑卒中约占其中的87%[1-2]。脑卒中患者常存在不同程度的功能障碍,其中约2/3的患者出现执行功能/注意力、记忆、视空间等至少1 个领域的认知功能下降,严重影响患者的依从性和整体康复[3-4]。本课题组前期研究发现,神庭和百会是针刺治疗脑卒中后认知障碍常用的穴位[5],同时电针神庭、百会能够有效改善卒中后患者认知功能,提高生活自理能力[6-7],然而具体的作用机制仍需深入研讨。脑源性神经营养因子(BDNF)可促进神经细胞发育、成熟,在维持神经元存活、增加神经递质的合成中具有重要作用[8-9]。BDNF 与其特异性受体酪氨酸激受体B(TrkB)结合后,可激活下游磷脂酰肌醇3 激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路,与细胞凋亡、自噬、突触可塑性密切相关[8,10-11]。基于此,本研究通过构建大脑中动脉缺血再灌注(MCAO/R)后学习记忆障碍大鼠模型,观察了电针对大鼠海马神经元的保护作用及对BDNF/TrkB/PI3K/Akt 信号通路的影响。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物 2021 年5 月—2022 年3 月选取60 只8 周龄健康雄性SD 大鼠,体质量180~220 g,SPF 级,购自济南朋悦实验动物繁育有限公司〔动物许可证号:SCXK(鲁)2019003〕。饲养于河南中医药大学第一附属医院实验动物中心,保持室温20~26 ℃,湿度50%~70%,12 h 光照,自由饮食、饮水。本研究严格遵循实验动物伦理保护规定执行,并通过河南中医药大学第一附属医院实验动物伦理审查委员会的批准(YFYDW2021030)。

    1.2 主要试剂和仪器 戊巴比妥钠(上海氟德化工有限公司,货号:21642-83-1),硫酸庆大霉素〔上海现代哈森(商丘)药业有限公司,货号:1405-41-0〕,线栓(北京西浓科技有限公司,货号:2036A6),多聚甲醛(biosharp 生物科技,货号:BL539A),中性树胶(中国医药集团有限公司,货号:96949-21-2),2%(2,3,5-氯化三苯基四氮唑)TTC 染色液(北京索莱宝科技有限公司,货号:T8170),总RNA 提取试剂盒(北京索莱宝科技有限公司,货号:R1200),蛋白提取试剂盒(北京索莱宝科技有限公司,货号:R0010),BCA 蛋白定浓度测定试剂盒(北京索莱宝科技有限公司,货号:PC0020),彩虹光谱蛋白Marker(北京索莱宝科技有限公司,货号:PR1920)、增强型化学发光(ECL)显色液(北京索莱宝科技有限公司 ......

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