樊赟，窦润鹏，胡久略，侯紫君，周春祥*

    1.210046 江苏省南京市，南京中医药大学

    2.473000 河南省南阳市中心医院

    3.473000 河南省南阳市，南阳理工学院张仲景国医国药学院 河南省张仲景方药与免疫调节重点实验室

    1 材料与方法

    1.1 实验时间

    2022年1—9月。

    1.2 实验动物

    6～8周龄雄性SPF级SD大鼠75只，体质量(200±20)g，购自广东维通利华实验动物技术有限公司，生产许可：SCXK(粤)2022-0063。

    1.3 主要药品和试剂

    PA(购自四川恒诚致远生物科技有限公司，货号：N1629)；淀粉样β蛋白片段25-35(Aβ25-35)(购自美国sigma公司，货号：A4559)；尼氏(Nissl)染色液(货号：C0117)、丙二醛(MDA)检测试剂盒(货号：S0131S)、谷胱甘肽(GSH)检测试剂盒(货号：S0053)购自碧云天生物科技有限公司；亚铁离子(Fe2+)含量检测试剂盒(货号：BC5415)、普鲁士蓝染色试剂盒(核固红法)(货号：G1422)购自索莱宝生物科技有限公司；Alexa Fluor? 647荧光标记神经元核抗原(NeuN)抗体(货号：ab190565)、GPX4(货号：ab219592)、Alexa Fluor? 488标记的羊抗兔IgG(货号：ab150081)、Nrf2(货号：ab31163)、SLC7A11(货号：ab175186)抗体购自Abcam公司。

    1.4 主要仪器

    Morris水迷宫(型号WMT-100S，成都泰盟软件有限公司)；荧光显微镜(型号BX53，日本Olympus公司)；电泳仪(型号DYY-6C，北京六一生物科技有限公司)；凝胶成像仪(型号Gel Doc EZ，美国BIO-RAD公司)。

    1.5 实验方法

    1.5.1 采用随机数字表法将大鼠分为对照组(Control组)、AD模型组(Model组)、PA治疗组(PA组)，PA+Nrf2抑制剂组(PA+ML385组)，每组15只大鼠。

    1.5.2 造模与给药：参考文献[8]的方法制备AD大鼠模型，除Control组外，其余组大鼠双侧海马缓慢注射5 μL Aβ25-35(浓度2 g/L)，Control组双侧海马注射等量0.9%氯化钠溶液，给药7 d后进行Morris水迷宫实验，其中平均逃避潜伏期较Control组大鼠明显延长 ......