幽门螺杆菌ＶａｃＡ毒性亚单位在大肠杆菌中的分别表达

http://www.100md.com 2004年2月1日 杨贵珍 刘钟滨 袁建平 胡宝瑜 时晓东 郭晓奎

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     摘要：目的 用基因工程方法获取幽门螺杆菌vacA基因毒性相关片段p37和p58,以深入研究VacA的致病机制。方法 用PCR技术,扩增幽门螺杆菌vacA基因的两个片段p37、p58,并克隆入原核动力表达载体pQE-31,构建质粒pQE31-p37和pQE-31-p58,转化大肠埃希菌M15,IPTG诱导蛋白质表达,用Ni-NTA柱纯化融合蛋白。结果 SDS-PAGE分析显示,经IPTG诱导的E.codi M15表达出相对分子量分别为37kDa和58kDa的P37和P58融合蛋白质,SDS-PAGE分析表明,表达的蛋白质经含Ni-NTA的层析柱纯化后为单一蛋白质。 结论 成功构建了原核表达载pQE31-p37和pQE31-p58,获得了高纯度的单一蛋白质,为进一步探讨VacA的生物学活性及VacA抗体的制备鉴定了基础。关键词： 幽门螺杆菌； VacA； 亚单位； 表达中国分类号： R 378.2

    文献标识码：A

    http://www.100md.com/html/paper/1008-0392/2004/01/03.htm

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