廖锦彬，张 倩，周妙姿，李楚文，周 莹，张建军

    (1.广东省第二中医院(广东省中医药工程技术研究院)，广东 广州 510095；2.广州医科大学，广东 广州 511436；3.广州中医药大学，广东 广州 510006)

    肺癌是最常见的恶性肿瘤，非小细胞肺癌(nonsmall cell lung carcinoma, NSCLC)在肺癌中占比最大，其病死率也常居癌症死因的首位[1]。当前，化疗方案仍是肺癌治疗的主要措施。吉非替尼(Gefi‐tinib,GEF)是经典的表皮生长因子受体酪氨酸激酶(epidermal growth factor receptor-tyrosine kinase,EGFR-TKI)抑制剂，临床对NSCLC 肺癌患者具有显著效果[2]。但由于EGFR 突变和肿瘤干细胞增多等原因，GEF 治疗后往往出现肿瘤耐药(multiple drug resistance, MDR)，导致患者的预后和生存较差。因此，寻找高效安全的药物用于EGFR-TKI辅助治疗和克服耐药性，目前临床肺癌治疗的迫切需要。

    紫背万年青(Rhoeo discolor(L’Herit.)Hance)属于鸭跖草科植物，《全国中草药汇编》记载，其以花叶入药，具有清热化痰，凉血止痢的功效；用于肺燥咳嗽，咯血，百日咳，淋巴结结核，痢疾，便血[3]。已有研究报道，紫背万年青对于结肠癌、肝癌、前列腺癌的细胞增殖均有抑制作用，能减少癌前病灶数量和面积，拮抗二乙基亚硝胺对肝细胞的损害[4-6]。基于紫背万年青对于多种癌细胞的抑制作用，及其临床实践基础，本研究拟探讨紫背万年青提取物(Water ex‐tract from Rhoeo discolor,WER)与GEF 联用对A549肺癌细胞的协同作用，并阐明其可能的分子机制，为紫背万年青作为肺癌治疗的辅助药物或化疗增敏剂提供科学依据。

    1 材料与方法

    1.1 细胞株 人肺癌A549 细胞广州吉妮欧生物科技有限公司。

    1.2 药物与试剂 紫背万年青花水提液由广东省第二中医院制备(浓度：0.75g/ml 的生药量，批次：202012001#)。DMEM 培 养 基(11965118)、RPMI-1640 培 养基(11875119)、胎牛 血 清(10100147)、0.25% 胰蛋白酶(25200056)、青霉素和链霉素(15140122)等购自Gibco 公司(美国)；吉非替尼(SML1657)购自Sigma 公司(美国)；抗体Bcl-2(4223)、Bax(2772)、p-PI3K(4228)、p-Akt(4060)和GAPDH(5174)等购 自CST 公司(美 国)；CCK-8(C0041)、Annexin V-FITC 细 胞凋 亡 检测 试 剂盒(C1062S)、细胞周期检测试剂盒(C1052)和PBS 购自上海碧云天公司(中国)；超敏ECL 化学发光试剂盒(G2020)购自武汉塞维尔生物科技(中国) ......