补气活血合剂对脑缺血再灌注模型大鼠血清外泌体及Nestin、GFAP蛋白表达的影响*
1材料与方法,1实验动物与分组,2主要仪器与试剂,3模型制备,4干预方法,5观察指标,6统计方法,2结果,1神经功能缺损评分,2脑梗死体积,3神经损伤程度,4蛋白表达,3讨论
刘 通,廖翔宇,陈玉宁,蒋 颖,陈琼君,熊 亮,邝伟川,文 希,刘 悦△(1.广州中医药大学第五临床医学院,广东 广州 510095;2.广东省第二中医院(广东省中医药工程技术研究院),广东 广州 510095)
脑卒中严重危害人类健康和生命安全,其发病率高、病死率高、致残率高、复发率高。2019 年,发表于柳叶刀子刊《Lancet Neurology》的一项研究对1990 年至2019 年的204 个国家和地区进行了调查,调查结果显示:全球有1220 万中风发病病例,1.01亿中风患病病例,1.43亿伤残调整寿命年中风病例,以及655 万中风死亡病例。该结果表明:中风仍是世界第二大致死原因、第三大致残原因(按伤残调整生命年衡量)[1]。在我国,缺血性脑卒中在所有脑卒中患者中所占比例可高达85%,缺血性脑卒中幸存者中约有3/4 的患者遗留有不同程度的劳动能力丧失,给社会、家庭带来极大的负担[2-3]。因此,进一步探讨如何促进脑卒中后肢体功能障碍的康复仍是全球亟待解决的问题。
补气活血合剂(原名:中风复元合剂)是我院院内制剂,对治疗气虚痰瘀型缺血性脑卒中有显著的临床疗效[4-5],然而其具体起效机制仍不明确。近期,有多项研究表明小胶质细胞、少突胶质细胞、星形胶质细胞和神经干细胞等多种中枢神经系统细胞均能分泌外泌体,并调节神经系统疾病的发生和发展,这些中枢神经系统细胞衍生的外泌体在促进血管生成、调节炎症和中风后大脑重塑方面发挥着关键作用[6-7]。巢蛋白(Nestin)是神经干细胞的特征性标志物,胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)是星形胶质细胞活化的标志物,卒中后神经细胞的再生多伴随有Nestin 和GFAP 的表达升高[8-9]。因此,本研究拟观察补气活血合剂对脑缺血再灌注模型大鼠血清外泌体及Nestin、GFAP蛋白表达的影响,进一步明确其起效机制,促进补气活血合剂的进一步推广应用。
1 材料与方法
1.1 实验动物与分组
选取40 只成年雄性SPF 级SD 大鼠(广东省动物实验中心提供,合格证号:SCXKC(粤)2022-0002),体重200±20g。于广东省第二中医院动物实验中心分笼饲养,5 只/笼,温度25℃左右,相对湿度50%~60%,明暗周期12h,自由饮水、摄食,适应性饲养7天后将大鼠随机分为假手术组、模型组、补气活血合剂组、合剂+GW4869 组各10 只。按科技部2006 年发布的《关于善待实验动物的指导性意见》处理实验动物 ......
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