脐带血有核细胞不同提取和保存方法的比较
单核细胞,细胞分离方法,细胞冻存与复苏,甲基纤维素,脐血有核细胞,红细胞,形成能力,裂解液
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李康智 秦胜花 乔伟 冯乐平 桂林医学院生物技术学院;桂林医学院附属临床学院;
【摘要】目的:通过对脐带血有核细胞(CBNC)的提取和保存方法探讨,为脐带血有核细胞分离、储存和应用提供科学依据。方法:采用3种方法(Ficoll-Paque分离液法、1%甲基纤维素法、红细胞裂解法)分离CBNC,并应用不同储存液在不同时间对细胞进行冷冻和复苏培养。结果:红细胞裂解液法分离所获得的有核细胞数分别是Ficoll-Paque分离液方法的2.9倍(P0.05)和1%甲基纤维素分离方法的10倍(P0.01);且红细胞裂解液法所得有核细胞种类(包括淋巴细胞、中性粒细胞和单核细胞)也明显增多;细胞集落形成率与前两种方法比较亦有显著性差异。H3-TdR掺入的细胞活力观察发现,在4℃和20℃条件下存放24h,不同温度下细胞活力没有明显改变。以人脐血血清+DMSO为保护液在液氮储存CBNC 1年,复苏后仍有很强的细胞集落形成能力。结论:应用红细胞裂解液分离提取CBNC获得的细胞数量和种类优于其他两种方法。CBNC冻存时适当加入人脐血清,复苏后克隆形成能力明显增强。
【关键词】 脐带血 单核细胞 细胞分离方法 细胞冻存与复苏 甲基纤维素 脐血有核细胞 红细胞 形成能力 裂解液 保存方法
【基金】广西科技厅资助项目(项目编号:0249020)
【分类号】R329
胎盘脐带血含有多种有核细胞成分,其中造血干细胞的单位体积含量比骨髓和外周血含量还高,除含有造血干/祖细胞外,还具有间充质干细胞、内皮前体细胞等[1-2]。应用脐带血干细胞替代骨髓移植,能成功地恢复强力化疗后的骨髓抑制,恢复再障患者的骨髓造血;应用造血干细胞的移植还
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摘要：目的：通过对脐带血有核细胞(CBNC)的提取和保存方法探讨，为脐带血有核细胞分离、储存和应用提供科学依据。
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