荧光定量PCR检测HBV-DNA室内质控物的制备及初步应用
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邹单东 郑楚 广西医科大学第四附属医院检验科;桂林医学院;
【摘要】目的:利用混合血清自制荧光定量PCR HBV-DNA室内质控血清,并对其在日常工作中的应用进行评价。方法:分别留取进行健康体检的多人两对半全阴的血清作为基质,"大三阳"作为高值血清,"小三阳"作为低值血清,用全阴血清将高值和低值血清稀释至(5.0±2)×106拷贝/m l和(5.0±2)×103拷贝/ml两个水平。与临床样本采用荧光定量PCR方法同时检测,其结果计算X、S、CV值,并在L every-Jennings室内质控图绘图,并结合应用W estgard多规则质控判断方法[1]。结果:高值:X=6.758277(对数值),S=0.203284(对数值),CV=3.0%。低值:X=3.66921(对数值),S=0.32195(对数值),CV=8.77%。结论:利用混合血清制备的HBV-DNA室内质控物,其制备方便,结果稳定,有一定的实用价值。
【关键词】 荧光定量PCR HBV-DNA 室内质控物
【分类号】R450
目前国内所用的T aqm an实时荧光定量PCR均采用外标法,受模板浓度、PCR反应体系的批间差异影响较大。因PCR检测结果为指数增长,目前尚无统一的室内质控标准,本实验室应根据自身条件,采用“大三阳”、“小三阳”和全阴性混合血清制备的高、低值和阴性对照血清作为HBV-DNA室内
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摘要：目的：利用混合血清自制荧光定量PCRHBV-DNA室内质控血清，并对其在日常工作中的应用进行评价。方法：分别留取进行健康体检的多人两对半全阴的血清作为基质，“大三阳”作为高值血清，“小三阳”作为低值血清，用全阴血清将高值和低值血清稀释至(5.0±2)×106拷贝/ml和(5.0±2)×103拷贝/ml两个水平。与临床样本采用荧光定量PCR方法同时检测，其结果计算X、S、CV值，并在Levery-Jennings室内质控图绘图，并结合应用Westgard多规则质控判断方法。结果：高值：X=6.758277(对数值)，S=0.203284(对数值)，CV=3.0%。低值：X=3.66921(对数值)，S=0.32195(对数值)，CV=8.77%。结论：利用混合血清制备的HBV-DNA室内质控物，其制备方便，结果稳定，有一定的实用价值。
关键词：荧光定量PCR HBV-DNA；室内质控物
中图分类号：R446.61 文献标识码：A 文章编号：1008-2409(2009)04-0617-03
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