摘要：目的：构建一种高效转染hCD4和hCCR5基因的慢病毒载体。方法：应用Gateway技术构建可表达hCD4和hCCR5的质粒载体PLA.ExBi.P/puro-CMV-CD4-IRES-CCR5，并进行酶切和测序鉴定，进行慢病毒包装，用qRT-PCR方法检测293T細胞中hCD4/CCR5的mRNA表达。将本慢病毒载体转染于小鼠白血病细胞L615，应用qRT-PCR检测细胞内hCD4/CCR5 mRNA的表达及对HIV-1的易感性。结果：成功构建PLA.ExBi.P/puro-CMV-CD4-IRES-CCR5质粒表达载体，包装成的慢病毒载体在293T细胞中具有hCD4/CCR5 mRNA水平的高表达(P<0.05)；转染于L615细胞亦表现出hCD4/CCR5 mRNA水平的高表达(P<0.05)，并具备了HIV-1入胞感染的特点。结论：成功建立hCD4和hCCR5基因双启动的慢病毒载体 ......