瘦素对乳腺癌MDA-MB-231细胞MMP14调控作用的研究①
抑制剂,通路,1材料与方法,1细胞株与主要试剂,2细胞培养,3westernblot法检测细胞MMP14的蛋白表达水平,4MTT法检测细胞增殖率,5划痕实验检测细胞迁移能力,6统计学分析,2结果
周雪清,刘倩倩,张 杰,刘文慧,杨姝娅,骆耐香③(1.桂林医学院免疫学教研室,广西 桂林 541004;2.川北医学院附属医院检验科,四川 南充 637000;3.桂林医学院第二附属医院检验科,广西 桂林 541199)
流行病学研究表明,乳腺癌已成为威胁全球女性健康和生命主要的因素之一[1],而肥胖与乳腺癌的患病风险和其临床行为密切相关[2]。瘦素(leptin)是由脂肪组织分泌的与肥胖有关的重要激素,能够与瘦素受体结合后通过调节饮食摄入和能量代谢参与体内内环境平衡的维持[3],同时它还参与了机体卵巢癌、胃肠道肿瘤等多种肿瘤的发生和发展[4]。膜型基质金属蛋白酶(membrane-type matrix metalloproteinase-1,MT1-MMP)即MMP14属于基质金属蛋白酶家族,它直接或间接降解细胞外基质中的多种成分,与肿瘤的侵袭与迁移密切相关[5]。已知瘦素与MMP14均可促进乳腺癌的发生与发展[2-5],而两者之间在乳腺癌是否有关联目前尚无相关的研究报道。因此,本课题组以乳腺癌细胞系为研究对象,探讨瘦素是否可以通过影响MMP14的表达促进乳腺癌发生和发展,为开发一种乳腺癌新型治疗靶点提供思路。
1 材料与方法
1.1 细胞株与主要试剂
人乳腺癌细胞株MDA-MB-231购自中国科学院上海细胞库。人重组瘦素购自美国 Peprotech公司,RPMI1640培养基及胰蛋白酶由美国Gibco公司提供,胎牛血清由美国Gemini公司提供,兔抗人MMP14抗体由Abcam公司提供,鼠抗人β-actin抗体及相关二抗由北京中山金桥生物有限公司提供,MTT试剂盒由北京索莱宝科技有限公司提供,ERK1/2、JNK、P38的信号通路抑制剂FR180204、SP600125、SB203580均由上海蓝木化工有限公司提供 ......
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