彭佳聪,官宏莉,李媛媛,蒋莉萍,彭小红

    (桂林医学院基础医学院人体寄生虫学教研室,广西 桂林 541199)

    疟疾是世界上严重危害公共卫生的三大传染病之一,主要通过感染疟原虫的雌性按蚊叮咬而传播。据WHO估计,2019年全球共有2.29亿人感染疟疾,导致约40.9万人死亡,其中2/3为撒哈拉以南非洲地区5岁以下儿童[1]。近年来,尽管疟疾防控已取得巨大进展,但疟疾患病及死亡人数仍居高不下,其原因主要是杀虫剂及抗疟药物耐药性的扩散[2-3]。因此,新型抗疟药物和疟疾疫苗的研制变得尤为迫切。

    过去70多年来,全球在疟疾疫苗研制方面进行了艰苦的努力,但尚未开发出一种安全、有效的疟疾疫苗[4]。由于疟原虫抗原具有高度多态性,以疟原虫表面优势抗原为基础的亚单位疫苗产生的免疫保护性受限[5-6],使得近年来疟疾疫苗的研发焦点逐渐转移至全虫疫苗。实验证实,疟原虫红内期全虫减毒疫苗对疟原虫再感染具有免疫保护作用,但其免疫过程中可能因减毒不完全而导致接种者出现疟原虫感染[7-8]。因此,全虫灭活疫苗或许能成为红内期疟疾疫苗研制的突破点。本研究在疟原虫感染康复期小鼠红细胞内发现类似Howell-Jolly小体的单点状深紫染颗粒,采用约氏疟原虫感染小鼠模型,制备及富集该颗粒,并以此为抗原免疫小鼠,检测其接种安全性和免疫保护性,为其作为疟原虫红内期全虫灭活疫苗的研究奠定基础。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    健康清洁级雌性BALB/c小鼠40只,6~8周龄,购自湖南斯莱克景达实验动物有限公司;健康普通级雌性昆明株小鼠40只,6~8周龄,购自桂林医学院实验动物中心;约氏疟原虫(Plasmodium yoelii,P.yoelii)BY265株,为本室长期保存虫株;甲醇购自西陇科学股份有限公司;姬姆萨染液购自珠海贝索生物技术有限公司;磷酸氯喹(chloroquine phosphate,CQ)购自上海阿拉丁生化科技股份有限公司;生理盐水购自广西裕源药业有限公司;磷酸盐缓冲溶液(phosphate buffer solution,PBS,0.1 mol/L,pH 7.5)购自美国Sigma公司 ......