闫风智,刘 瑶,蒋 立,任亚萍,杨 森,卢德杰

    (桂林医学院a.基础医学院;b.临床医学院;c.组织学胚胎学教研室,广西 桂林 541199)

    妊娠过程极其复杂,子宫蜕膜化作为整个妊娠周期的关键步骤,是胚胎植入成功的前提并决定着后期滋养细胞的侵袭程度,在一定程度上对后期胚泡着床、胎盘形成等一系列过程起到精确调控作用[1]。细胞为适应机体生长发育的需求而进行的自我淘汰过程称为凋亡,这种程序性细胞死亡模式补充了经典的半胱天冬氨酸蛋白酶介导的凋亡模式[2],而且细胞凋亡在整个妊娠周期中都发挥了极其重要的作用。RBM10基因是位于X染色体上的RNA结合蛋白和凋亡相关基因的剪接调节剂[3]。RBM10的表达诱导细胞凋亡、抑制细胞增殖[4],在细胞凋亡的进程中,caspase-9作为线粒体凋亡通路的起始因子,caspase-9的释放可激活下游的凋亡因子,最终导致活化的半胱天冬蛋白酶发生层叠级联反应引发细胞凋亡[5]。故本实验研究探讨RBM10、caspase-9和eNOS在孕鼠早中期蜕膜组织表达及意义。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物

    雌性未交配的昆明鼠35只(SPF级),鼠龄(49±2)d,体重25.0~30.0 g;雄性昆明鼠6只,鼠龄(56±2)d,体重40.0~50.0 g左右(均购于湖南斯莱克景达实验动物有限公司,SPF级)。动物饲养于光照周期为12 h开灯,12 h关灯的明暗变化环境中,每天光照时间段为6∶00~18∶00,相对湿度35.0%~45.0%,室温保持24℃左右,可自由采食、饮水(饮用水经过消毒处理)。本研究获得桂林医学院实验动物委员会的批准。

    1.2 实验材料

    RBM10、caspase-9以及内皮型一氧化氮合酶(eNOS)的兔抗鼠多克隆抗体(均购自北京中杉金桥);瑞氏染液(安徽雷根生物);中性树胶(珠海贝索生物);乙醇,石蜡,福尔马林DAB(北京中杉金桥);包埋器、石蜡切机、染色操作台、恒温水浴锅;显微镜(日本奥林巴斯) ......