大鼠脂肪干细胞(rADSCs)转运VEGF基因促进随意皮瓣成活率的研究(2)
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参见附件(1911KB,4页)。
2 结果
2.1 rADSCs的分离和培养以及鉴定:原代培养的rADSCs在贴壁后细胞形态均一,呈梭形的单层成纤维细胞样。流式细胞学检查示第3代rADSCs均一性较好,CD49天阳性率为95.3%。
2.2细胞转染与筛选效果:经转染和G418筛选后,非转染组的和pcDNA3.1(一)空载体转染组的细胞100%死亡,而pcDNA3.1-VEGFl65重组质粒转染组的细胞在筛选约2周后有数量较多的细胞集落,提示克隆化基因的细胞转染及G418筛选效果良好。
2.3 ELISA检测转染后细胞上清中VEGF浓度
2.4动物实验中大白鼠在手术后生命体征平稳,精神好,进食和饮水均好。术后7天,各组皮瓣的成活面积如下(表3、图1),术后3天皮瓣远端皮肤组织抗Brdu免疫组化染色(图2)。
3 讨论
脂肪组织的基质成分中含有具有自我更新和多能分化潜能的脂肪干细胞(adipose derived stemcells,ADSCs),我们以往的研究结果表明脂肪组织可以促进皮肤创面的愈合。由于脂肪组织来源广泛,取材方便,可以获得的基质细胞数量大 ......
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