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编号:11507494
DOC-1基因的原核表达载体构建及其重组蛋白的表达纯化(2)

     3.2 重组表达载体的构建与鉴定:从转化了重组质粒的DH5α菌株中提取质粒,用BamH Ⅰ和Xho Ⅰ进行双酶切鉴定,可见电泳中有一约348bp左右的目的基因片断和一大分子量的载体片断,测序结果也显示与人的DOC-1基因中CDS序列(GenBank NM-004642)一致。

    3.3 重组蛋白的原核表达鉴定:SDS—PAGE分析结果显示,经IPTG诱导的含重组质粒的E.coliBL21在相对分子量38000左右的位置上出现一条新的条带。

    3.4 重组蛋白的纯化:超声破碎菌体并离心后,分别取裂解液上清与沉淀进行SDS—PAGE,显示目的蛋白主要在上清中表达 ......
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